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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】能不能pcr后产物直接酶切？
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michaelchen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】能不能pcr后产物直接酶切？ 已有10人参与

请问各位有人做过pcr扩增后直接对产物进行酶切，不通过胶回收的吗？我的pcr产物量太少了，回收后都看不到了！
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1楼 2010-05-19 10:56:57
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cheo163

金虫 (小有名气)
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lstt09nk(金币+1):同意~~ 2010-05-19 16:53:55
如果你的pcr体系是50ul，一般就可以直接把溶液纯化后酶切，不用割胶~~
25ul体系就太少了，没什么东西。
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8楼2010-05-19 13:18:21
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匿名

用户注销 (小有名气)
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1949stone(金币+1):同意 2010-05-19 11:10:35
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2楼2010-05-19 11:10:13
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jasco

木虫 (正式写手)
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amisking(金币+1): 2010-05-19 12:31:11
如果条带单一，可以溶液回收后再切，pcr产物直接酶切效果不好
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3楼2010-05-19 11:23:12
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humants

金虫 (正式写手)
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amisking(金币+1):good！ 2010-05-19 12:31:18
如果不打算做TA克隆，要注意引物设计的时候在5‘端多加几个辅助碱基，增加酶切效率，要不很难切开
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4楼2010-05-19 11:28:26
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