24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4199)
>硕博家园 (1052)
>虫友互识 (1045)
>导师招生 (264)
>文献求助 (245)
>休闲灌水 (161)
>考博 (145)
>博后之家 (122)
>海外博后 (100)
>学术会议 (82)
>论文投稿 (81)
>招聘信息布告栏 (72)
>催化 (37)
>考研 (28)
>绿色求助(高悬赏) (21)
>基金申请 (20)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qianggene

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 136.2
帖子: 70
在线: 6.6小时
虫号: 893544
注册: 2009-11-04
专业: 食品科学基础

[交流] 【求助/交流】酶切问题求助！！！已有10人参与

各位虫友，小妹有一问题请教，我最近酶切质粒（PMD-18T)总是切的相当不好，不是切不开，而是切开的目的带特别弱，但质粒很亮，是我加的质粒浓度太高了吗，但我保证加的量是小于1微克。我用的酶是ASCI和NCOI，请高手指点，不胜感激！

回复此楼

» 猜你喜欢

KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有122人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复

1楼 2010-05-11 20:13:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2109.3
帖子: 793
在线: 22.2小时
虫号: 326115
注册: 2007-03-17
性别: MM
专业: 微生物/分子生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

商品化的酶50ul两种各家1ul已经很多了。
楼主主要还是要明白质粒本身和目的片段之间的长度比是多少，如果完全切开亮度比是多少？如果没有双酶切，单酶切的条带又占了多少？
明白了这些问题再给酶切的效率下个片段，做一次克隆，我一般都是800ng左右的20ul切开做胶回收，目的片段回收完后的浓度一般很低，在25ng/ul左右，但取个6ul做酶连转化也很够了