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【求助】高效液相色谱的有关问题 已有15人参与
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| 最近使用液相色谱检测时，流速不高的情况下柱压却很高.请问这是不是由于柱子被堵了？我们能自行清洗柱子吗？谢谢帮忙！ |
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xuzhouenhua
铁杆木虫 (知名作家)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
biore7456(金币+2):感谢参与！欢迎常来分析版！ 2010-05-10 07:17:55
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1 柱压升高的解决: 色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点： （1）、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染； （2）、色谱柱头的填料被样品污染； （3）、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出； （4）、流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。 解决办法如下： （1）、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10％的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。 （2）、如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。 （3）、如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。 （4）、如果因PH值使用不当，很难恢复。 2 新柱子的处理: (1)反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡. (2)平衡时，应首先用0.2ml/min的流速将色谱柱平衡过夜，然后将流速升高到1.0ml/min冲洗30分钟，以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳状态，这样可以保证色谱柱的使用寿命，并且保证在以后的使用中，获得分析结果的重现性。 来源于http://ask.bbioo.com/ask/show-793.html |
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