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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA提取缓冲液的问题（乳白色还是澄清）
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yourandeziwo

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNA提取缓冲液的问题（乳白色还是澄清） 已有11人参与

大家好，我有个问题想请教下大家，DNA提取缓冲液配好后应该是澄清的还是乳白色的？
我配了50ml的溶液，配方是
Tris-hcl  100mM,     EDTA 100mM,     磷酸钠 100mM,   
氯化钠1.5M   CTAB  1%     PVPP 2%
问问大家一般都是怎么配的，要是有愿意帮忙的请写下详细步骤。
我的步骤是算出相应的质量，然后称量，加水，最后调PH 8.0，但是最后有很多白色的沉淀，溶液是乳白色的，请大家帮忙分析下，我的问题出在哪？是不是前面三个应该单独配，单独调PH  8.0然后再混合。请大家批评指正。。谢谢了。
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和虫友们一起进步。。
1楼 2010-05-08 22:28:08
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-09 03:31:00
我们一般是分步溶解
PVP在加热条件下溶
加了2-ME后就不会是乳白色了
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2楼2010-05-08 22:36:13
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yourandeziwo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-05-08 22:36:13:
我们一般是分步溶解
PVP在加热条件下溶
加了2-ME后就不会是乳白色了

你好，朋友，请问下，你们不是加PVPP么？加的是pvp（两者能达到相同的效果么？），一般在加热到多少度溶解啊，最后那个2-ME是什么啊，谢谢了
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和虫友们一起进步。。
3楼2010-05-08 22:56:58
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xpb2005

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-09 03:31:36
我们配完的感觉也是乳白色的，像是有沉淀似地，不过效果挺好的
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4楼2010-05-08 22:59:26
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gaiyf

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-09 03:31:45
有乳白色是不用担心的，等灭完菌以后就是澄清的了
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多看文献，多学知识
5楼2010-05-09 00:11:40
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
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plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-09 03:31:56
貌似就是有点浑，用前预热一下就行。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-05-09 00:46:22
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yourandeziwo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-05-08 22:59:26:
我们配完的感觉也是乳白色的，像是有沉淀似地，不过效果挺好的

朋友，谢谢了，但是我有点还是不大明白，我的配方对么？是不是就是这六样东西，浓度就这样么？最重要的是那个PVPP，我是不是加错了，应该加PVP啊。两者我查了下，以个是聚乙烯比咯烷酮（可溶），另一个是聚乙烯聚吡咯烷酮（不溶），两者能起到相同作用么？
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和虫友们一起进步。。
7楼2010-05-09 07:24:48
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ZOEY21

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-09 09:42:35
我们配出来的也是看着有点儿发白 效果没问题 而且配出的药用时都没有灭菌就用了  pvp和pvpp好像就是分子量不太一样，不过我们用的也是pvp
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8楼2010-05-09 09:18:01
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confusa

木虫 (小有名气)
★
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按理说你配完之后调了PH之后是澄清的
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9楼2010-05-09 10:02:19
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confusa

木虫 (小有名气)
PH 8.0是最终的PH，是需要最后调的
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10楼2010-05-09 10:03:20
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