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ldy1985木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】关于细菌蛋白的测定
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实验时需要测定浸出液中的细菌个数,文献用的是测定蛋白含量,引文献(翻译过来的,不一定准确) “测定液相中的蛋白,过滤细菌培养基,得到细菌细胞。培养基在15000转/min,离心15min,接着用pH2硫酸溶液洗得到无铁的细胞,然后用0.5M的氢氧化钠在沸水浴中消化。最后用硫酸溶液中和至pH7. 测定固相上的蛋白,矿样用pH2的硫酸溶液洗3-4次,除去吸附较松和包埋的细胞。然后把矿样在沸水浴中用氢氧化钠消化25min。消化液过滤,滤液用上面的办法,中和到pH为7.” 在这个过程中,用氢氧化钠消化细菌就是为了得到细菌蛋白吧,那氢氧化钠的量有要求不,再就是取中和的液体去测吸光度后,可以直接作为细菌的蛋白含量吗? |
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