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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

★ ★ ★
zhmy26(金币+4): 2010-05-11 15:19:36
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-12 23:26:12
1、原核表达的话,注意包涵体问题。那没活性。

2、真核表达,注意表达标签等共表达,导致多余,后期的切除也是麻烦。

3、你做的这个原核表达,若插入两个基因,可以用linker将其连接,有独立的,有分开的。一般是让两个基因处于不同的控制子之下。

4、共表达系统的质粒,转入基因时候,多考虑其表达蛋白的可溶性和表达丰度的一致性。

5、带有启动序列的质粒,可以直接用。自己添加强终止子也可以。
11楼2010-05-11 09:22:42
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zhmy26

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhwenxing at 2010-05-11 09:22:42:
1、原核表达的话,注意包涵体问题。那没活性。

2、真核表达,注意表达标签等共表达,导致多余,后期的切除也是麻烦。

3、你做的这个原核表达,若插入两个基因,可以用linker将其连接,有独立的,有分开的。 ...

您所说的linker大概意思我懂,是一种专用的序列吗?
另外,如何才能够注意表达的可溶性和丰度呢?

不好意思,实在是水平太差。这些天看书看的头大。快要进实验室了,却机会一无所知。

[ Last edited by zhmy26 on 2010-5-11 at 15:21 ]
12楼2010-05-11 15:20:28
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

zhmy26(金币+4): 2010-05-12 22:14:33
引用回帖:
Originally posted by zhmy26 at 2010-05-11 15:20:28:

您所说的linker大概意思我懂,是一种专用的序列吗?
另外,如何才能够注意表达的可溶性和丰度呢?

不好意思,实在是水平太差。这些天看书看的头大。快要进实验室了,却机会一无所知。

[ Last edited by ...

linker序列的设计比较灵活,上网一查就知道了。此外Takara的目录上有一部分linker的序列和介绍,参考一下。

处于不同启动子控制下的表达丰度有差异。蛋白的积累量也影响其表达。这个影响因素太多了。得摸索条件吧。  串联基因,我搞了几次,部分over。
13楼2010-05-12 19:03:24
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zhangjiewtt

金虫 (小有名气)

zhmy26(金币+1): 2010-05-13 09:39:37
同意一楼、五楼的观点
14楼2010-05-12 22:32:45
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pidou213

木虫 (正式写手)

zhmy26(金币+1): 2010-05-13 09:39:42
看客学习者!一起学习
见得多爱的多
15楼2010-05-12 23:17:39
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