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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 【求助/交流】大家来讨论下RT-PCR的试剂盒吧！
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xiajing_acm

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大家来讨论下RT-PCR的试剂盒吧！ 已有12人参与

大家好！前段时间做RT，但没有P出什么东西来！操作中均按照试剂盒上的说明来做的，我用的是TIANGEN的Trizol总PNA提取试剂盒和TIANGEN的Quant 一步法PT-PCR Kit试剂盒，不知道现在的试剂盒是一步法好还是两步法好？
   各位大侠用的是什么试剂盒呢？一步还是两步的？好的话可以交流下啊？
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1楼 2010-05-04 22:11:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 15:30:57
两步
Invitrogen的MMLV（促销价很便宜），做不出来就用SuperScript III
信不过国产的酶
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2楼2010-05-04 22:13:34
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ydniu

铜虫 (正式写手)
★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
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3楼2010-05-04 23:08:27
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★ ★ ★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-05 15:31:07
检测的话，一步

检测多个基因的话，两步。
Invitrogen的MMLV，SuperScript III都很OK。
注意mRNA 的质量！！！决定着cDNA哦。
再就是Fermentas的也很好用！
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4楼2010-05-05 02:04:49
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大力水手2892

木虫 (著名写手)
★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
强烈同意楼上的意见
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5楼2010-05-05 08:38:50
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ZOEY21

金虫 (小有名气)
★
xiajing_acm(金币+1):谢谢参与
天根的RT-PCR试剂盒很差啊 我刚刚订的...
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6楼2010-05-05 09:18:45
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marc0907

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Invitrogen的SuperScript III很好用
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7楼2010-05-05 12:24:00
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jieli.peng

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 15:31:16
Invitrogen的SuperScript III是很好用，但是也很贵哦，呵呵。其实我觉得反转录挺好做的啊，一般都不会出现转不出来吧。除非用的什么随即六聚体反转录细菌的RNA。这个好像不用试剂盒确实不好弄。我们实验室做植物的或者细菌特异基因的反转录就用的Fermentas的酶，挺好做的。
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8楼2010-05-05 12:50:55
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liyong1981

金虫 (正式写手)
很早以前，我做的时候，都是土方法，那用得起KIT啊，现在的娃，生活真是好，我上学那会要是有个试剂盒用，那高兴死了～
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9楼2010-05-05 13:39:45
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xiajing_acm

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ZOEY21 at 2010-05-05 09:18:45:
天根的RT-PCR试剂盒很差啊 我刚刚订的...

请问TIANGEN自己研发的Quant One Step RT-PCR Kit中的Quant RTase可靠吗？天根公司网站上说的神乎其神啊，还有Hotmaster Taq跟一般的Taq有什么不同吗？谢谢大虾了！
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10楼2010-05-05 22:47:39
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