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cwsm126030

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】Sephadex-LH20相关问题 已有4人参与

我现在在用Sephadex-LH20分我的样品,用甲醇-水系统,8:2的比例洗脱,流速0.4ml/min,2分钟接一次流分,然后点薄层,结果发现效果特别差,洗到最后的流分时候发现极性大的部位在薄层板上还能显示出来,极性小的部位也有,但是就是没分开,不知道是什么原因,望各位大侠支招,另外我用的柱子的规格是1.5*100cm的
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westzilch

铁杆木虫 (著名写手)


karl2100(金币+1):谢谢指点! 2010-05-05 13:07:27
cwsm126030(金币+1): 2010-05-05 20:23:05
Sephadex-LH20的分离原理主要是分子筛,如果你的化合物分子量相差都很小,是比较难分开的,而且如果你的样品还处于比较复杂的状态,过一次凝胶也是比较难纯的,所以建议楼主可以试试其他分离方法,或者如果还有点分离效果的话,可以反复过几遍试试
2楼2010-05-05 11:25:41
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a1100

金虫 (小有名气)

cwsm126030(金币+1): 2010-05-05 20:22:32
这个填料的柱子不太适合粗分,建议纯化到一定程度时再细分。另外虽说是分子筛原理,但是分子量相差较小时也能分的。
3楼2010-05-05 19:27:34
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cwsm126030

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by cwsm126030 at 2010-05-04 16:20:49:
我现在在用Sephadex-LH20分我的样品,用甲醇-水系统,8:2的比例洗脱,流速0.4ml/min,2分钟接一次流分,然后点薄层,结果发现效果特别差,洗到最后的流分时候发现极性大的部位在薄层板上还能显示出来,极性小的部 ...

你说我是不是用再上一次硅胶柱分离下 我已经过了两次硅胶柱了
4楼2010-05-05 20:23:53
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qdeev

金虫 (正式写手)

ODS柱?可以一试
5楼2010-05-05 21:22:45
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