| 查看: 2687 | 回复: 4 | ||||
[交流]
【求助/交流】生孢梭菌计数 已有4人参与
|
|
请问生孢梭菌的计数方法是什么呢？我要做无菌检查。谢谢各位。 在操作规范中的无菌检查中有这样的描述：生孢梭菌的新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中，培养18-27h.........上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每毫升含菌小于100菌落形成单位i的菌悬液 请问每毫升含菌小于100菌落形成单位i的菌悬液要怎么得知呢？是做计数吗？怎么做呢 [ Last edited by 王珊珊1987 on 2010-5-4 at 16:36 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 无菌检查 |
» 猜你喜欢
085404 298分求调剂
已经有6人回复
-
有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子
已经有9人回复
-
求调剂
已经有9人回复
-
求调剂 材料与工程 324分 专硕
已经有21人回复
-
0858求调剂
已经有7人回复
-
化学工程与技术324调剂
已经有24人回复
-
求调剂
已经有8人回复
-
电子信息279求调剂，有书读就行
已经有7人回复
-
311求调剂
已经有10人回复
-
人工智能320调剂08工类还有机会吗
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢
已经有13人回复
- 求助求助：红曲霉PDA液体培养计数 问题
已经有16人回复
- 枯草芽孢杆菌中试的时候PH上升过快，数量过低？
已经有25人回复
- 固体样品梯度稀释后用血球计数板计数
已经有7人回复
- 孢子是如何计数的？
已经有13人回复
- 稻瘟分生孢子计数
已经有7人回复
- 血球计数板计数子囊孢子的数量问题
已经有4人回复
- 请问环境中的芽孢杆菌怎么计数？十分感谢！
已经有3人回复
- 芽孢杆菌OD值与活菌数相对应的标准曲线
已经有9人回复
- 对芽孢进行诱变遇到的问题
已经有8人回复
- 斜生栅藻的计数方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】不产孢的真菌如何计算接种量
已经有26人回复
- 【求助/交流】促孢培养基
已经有3人回复
2楼2010-05-04 11:10:20
yushanyou12
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5800.5
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 357
- 在线: 81.9小时
- 虫号: 349358
- 注册: 2007-04-19
- 性别: GG
- 专业: 分子影像与分子探针
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+6):good！ 2010-05-04 20:50:59
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+6):good！ 2010-05-04 20:50:59
|
你是在药厂工作的？恩，菌悬液的浓度要求的确是每毫升小于100cfu，但是最好在50到100cfu之间，小于50的话容易出现假阴性。还有你是要做无菌的方法验证还是无菌培养基的灵敏度检查呢？至于确定菌的量，是在硫乙醇中计数的。 其实无菌方法验证中的菌悬液的制备也是依中国药典（2005年版二部）附录XI H无菌检查法中“培养基灵敏度检查”项下的方法，制备成小于100 CFU/ml的对照用菌液。所以无论你做什么，菌悬液的制备方法都是一样的。 具体方法就是，先把生孢梭菌在硫乙醇中培养24小时，然后吸取1毫升培养液用生理盐水进行10倍稀释，我的经验是，稀释到10的-7次方就是在100cfu以下了（这个你得自己多做几次平行实验或验证实验，看到底稀释到多少倍。最初不好把握的时候可以同时培养几个临近的梯度），然后取至少200ml的硫乙醇酸盐培养基到试管里（要求无菌），然后接种1ml制备好的菌悬液到硫乙醇试管里，在32.5度下培养18h，然后开始计数。生孢梭菌在液体的硫乙醇里会长成梭子一样的单个菌落，这时拿的时候千万不要震动，然后开始计数（一个单独的“梭子”计一个菌落）。 注：如果培养时间太长会产生浑浊，不便于计数。如果震动试管也会浑浊。硫乙醇的量尽量大一点，这样便于计数。 一些具体的东西，还需要你实际去操作后，发现问题，再解决问题。貌似你现在的经验不是很足，最好的是找个懂的人带你做几次，或去别的公司或研究所参观学习，这样学起来会快一点。最后祝贺你成功。 |
3楼2010-05-04 17:34:39
4楼2010-05-05 00:15:39
5楼2010-05-06 07:57:21
