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【求助】怎么样判断一张色谱分离图的好坏呢？已有9人参与
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| 怎么样评价一张色谱图分离的好坏？我分离的是中药样品，要做中药的指纹图谱，怎么样的数据就算是好的呢？分离度高？时间短？出峰数多？还是其它的什么？ |
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liuyufei3087
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2楼2010-04-28 10:33:13
wesker890211
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铁甲骑兵(金币+1):同意，找到目标物就好。别的不用关心。 2010-04-28 14:52
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我当时实习的时候做的是黄酮，可以说浓度非常高，导致无关峰出现很多而且量非常大，而我们当时所需要的只是槲皮素和山奈素两个峰，结果都没有得到。 关键是看你要哪几个峰，然后单测几个成分的保留时间，最后确定你的时间。做中药指纹图谱还是要看你的关键峰有没有，接着是峰面积是否达到要求，当然对分离度也有一定的要求。 至于峰数的问题看你的提取了，你不可能不跑板直接去过柱子吧？ 中药的峰面积范围给的非常大的，因为其中成分含量的确是非常的……你所有的全部出来了，接下来你肯定要跟着药典进行对比图谱吧，而且你绝对不会只有一张图谱。所以，平均着看问题吧～～～ |
3楼2010-04-28 10:34:24
4楼2010-04-28 10:47:54
5楼2010-04-28 10:53:42
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6楼2010-04-28 10:58:03
wesker890211
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呵呵，我用的是无线上网，没办法用QQ，我再详细解释一下吧～～～ 我那个时候的重点是槲皮素和山奈素，所以，先要把总黄酮提取出?恚缓笈馨澹纯从忻挥姓饬街治镏剩缓缶徒泄恿恕� 首先，你要配出槲皮素和山奈素的对照品，然后分别过柱子，测出它们各自的保留时间，这一步很重要！当时我们遇到的问题是我们用的是跑板的对照品，浓度太高，我的导师稀释了100倍还是量太大，最后我稀释了1000倍才跑出了像样的峰。还有，我们用的色谱甲醇杂质量还是蛮大的，绝对会出现杂质峰，要注意区分。 接着，把你提取的东西稀释稀释再稀释，我是稀释了100倍，然后过柱子，然后跑就是了。 具体跑多少时间是根据你的对照品的保留时间决定的，把最长保留时间的往后延长10分钟就差不多了，那就是你要过柱子的时间。 我那个时候记得40分钟出山奈素，所以我跑了50分钟。一共跑了三张图。 接着，按照槲皮素和山奈素的保留时间找到他们的峰，算出峰面积。 打印你的图，如果你能把药典从图书馆带出来的话，你就不用打印了。我只能带着图去图书馆，查你做的中药的指纹图谱，再根据你的数据确定质量。 做这些的前提条件是你一定要先在药典上查好了需要跑什么。 |
7楼2010-04-28 12:08:15
坏男孩№亮
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wesker890211
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10楼2010-04-28 14:27:54