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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 【求助】氨基酸含量测定
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jingcong198203

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】氨基酸含量测定 已有13人参与

大家好，有个问题向大家请教，我在测定蛋白中的氨基酸含量，我查了查有好四种柱前衍生方法，分别为异硫氰酸苯酯（PITC）法、6-氨基喹啉－N－羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯（AQC）法、邻苯二醛（OPA）和9-芴甲基氯甲酸甲酯（FMOC）法、2，4-二硝基氟苯（DNFB）法，我不清楚每种衍生方法的适用范围，所以不知道该选择哪一种衍生试剂？我的氨基酸有甘氨酸，丙氨酸，赖氨酸，谷氨酸，苯丙氨酸，谢谢啦！
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1楼 2010-04-23 15:57:15
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niuxiaohui

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢提供！ 2010-06-28 11:51:38
http://img1.chem17.com/5/20090723/633839395905156250.pdf
看看这个，应该对你有帮助
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2楼2010-04-23 16:18:30
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cindy_2010

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用过商业化的氨基酸分析柱（天津博纳艾杰儿），异硫氰酸苯酯（PITC）法，效果还好，标准品里有这五种氨基酸
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7楼2010-07-09 16:59:30
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azcaban

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流 2012-01-04 10:39:02
可以用PITC法。。。操作简单，检出限低，我曾经做过 检测限达到0.5ng级的。，线性很好，范围也很广，达到4个9。而且对于一二级氨基酸都可以反应。你上面提到的这几种氨基酸都可以和PITC反应。
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9楼2012-01-04 10:31:55
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普通回帖

xinlvl

铜虫 (小有名气)
我也正好学习学习
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3楼2010-04-23 18:38:19
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jingcong198203

铜虫 (初入文坛)
谢谢啦！
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4楼2010-04-28 09:02:54
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ymw520

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
路过学习一下
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行万里路
5楼2010-06-28 08:41:22
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jack757

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
谢谢楼上的同志，学习了。
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6楼2010-07-06 11:52:10
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a5342424

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
商业化的氨基酸分析柱（天津博纳艾杰儿）什么价位啊，路过学习下！！！
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知识是无穷的，真滴。。。
8楼2010-08-11 20:33:54
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ywxkjjh

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by azcaban at 2012-01-04 10:31:55:
可以用PITC法。。。操作简单，检出限低，我曾经做过 检测限达到0.5ng级的。，线性很好，范围也很广，达到4个9。而且对于一二级氨基酸都可以反应。你上面提到的这几种氨基酸都可以和PITC反应。

你好，你做过甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的PITC衍生化吗？

我做的甘氨酸衍生物有个肩峰，谷氨酰胺衍生物有两个峰。

色谱条件为：
柱子：Agilent SB-Aq 250mm*4.6mm, 5um
流动相A：50mM NaAC (pH=6.5)
流动相B：50mM NaAC (pH=6.5):ACN=1:1
Time:0-10-25-40min
B%:5%-5%-95%-95%
进样量10uL

请指教，谢谢！
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10楼2012-01-31 15:52:59
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