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jingcong198203

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】氨基酸含量测定 已有13人参与

大家好,有个问题向大家请教,我在测定蛋白中的氨基酸含量,我查了查有好四种柱前衍生方法,分别为异硫氰酸苯酯(PITC)法、6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(AQC)法、邻苯二醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)法、2,4-二硝基氟苯(DNFB)法,我不清楚每种衍生方法的适用范围,所以不知道该选择哪一种衍生试剂?我的氨基酸有甘氨酸,丙氨酸,赖氨酸,谷氨酸,苯丙氨酸,谢谢啦!
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ywxkjjh

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by azcaban at 2012-01-04 10:31:55:
可以用PITC法。。。操作简单,检出限低,我曾经做过 检测限达到0.5ng级的。,线性很好,范围也很广,达到4个9。而且对于一二级氨基酸都可以反应。你上面提到的这几种氨基酸都可以和PITC反应。

你好,你做过甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的PITC衍生化吗?

我做的甘氨酸衍生物有个肩峰,谷氨酰胺衍生物有两个峰。

色谱条件为:
柱子:Agilent SB-Aq 250mm*4.6mm, 5um
流动相A:50mM NaAC (pH=6.5)
流动相B:50mM NaAC (pH=6.5):ACN=1:1
Time:0-10-25-40min
B%:5%-5%-95%-95%
进样量10uL

请指教,谢谢!
10楼2012-01-31 15:52:59
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niuxiaohui

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢提供! 2010-06-28 11:51:38
http://img1.chem17.com/5/20090723/633839395905156250.pdf
看看这个,应该对你有帮助
2楼2010-04-23 16:18:30
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xinlvl

铜虫 (小有名气)

我也正好学习学习
3楼2010-04-23 18:38:19
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jack757

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
谢谢楼上的同志,学习了。
6楼2010-07-06 11:52:10
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