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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞培养中的HEPES的配制及使用
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gaozx123

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞培养中的HEPES的配制及使用 已有3人参与

我想请教一下关于HEPES的配制及细胞培养中的使用问题：
有的说1N HEPES配制时须用NaOH调pH值至7.5-8.0，然后分装；但是有的说直接用三蒸水配制后分装就行了。使用时直接加进培养基里。
关于使用终浓度：有的说是10mmol/L；有的说是20mmol/L。

我昨天配制了1N 的母液，没有用NaOH调pH值，直接用三蒸水配制好，过滤分装的，并且按照20mmol/L的终浓度加到DMEM培养基（含10% FBS）中的，但是发现颜色变的有点黄了，感觉变酸的样子。不知道是否有问题，请有经验的人交流讨论一下。
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1楼 2010-04-23 08:45:13
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gaozx123

金虫 (小有名气)
怎么没人交流一下呀
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2楼2010-04-24 10:29:34
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gaozx123

金虫 (小有名气)
真的很快就沉底了，没人交流吗？
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3楼2010-04-26 11:03:37
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
gaozx123(金币+2): 2010-04-26 21:26
我刚做，配的是1M HEPES,用10N的NaOH调pH到7.3. 经0.22um过滤分装后于4度保存。
    有事常交流！
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梦在路就在！
4楼2010-04-26 11:29:53
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silicare

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合伙创业版兼职版主

优秀版主
gaozx123(金币+2):谢谢交流 2010-04-26 21:27
HEPES浓度可达10-50mM，一般10mM，也就是2.38克/L,，
加入HEPES会增加缓冲效果,只要别超过50mM不会对细胞的生长有影响.
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5楼2010-04-26 11:54:52
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gaozx123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 雪山飞狐7233 at 2010-04-26 11:29:53:
我刚做，配的是1M HEPES,用10N的NaOH调pH到7.3. 经0.22um过滤分装后于4度保存。
    有事常交流！

为什么要调pH值呢？不调能不能用啊？
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6楼2010-04-26 21:29:01
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