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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于菌落PCR
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于菌落PCR 已有7人参与

最近做转化，然后挑转化子，培养后做菌落PCR，总是假阳性，不能扩增出目标条带。想请教下，菌落PCR结果准吗？要不要将转化子接LB液体提质粒后再做PCR鉴定啊？
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1楼 2010-04-19 21:26:18
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547star

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用载体的引物和插入片段的引物PCR，加入pfu 高保真酶，做好对照。
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为什么
7楼2010-04-20 13:08:49
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-19 22:58
提取质粒后酶切结果最可靠，起码应该做一两次，验证一下菌落PCR的结果，菌落PCR特别容易污染，有的时候扩增失败也是常事
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2楼2010-04-19 21:27:54
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weiminhb

铁虫 (小有名气)
这样啊，谢谢指教，我试试吧
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3楼2010-04-19 21:29:14
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pidou213

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
菌落PCR不如提取质粒后再P的好
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见得多爱的多
4楼2010-04-19 22:07:55
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