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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于菌落PCR 已有7人参与

最近做转化,然后挑转化子,培养后做菌落PCR,总是假阳性,不能扩增出目标条带。想请教下,菌落PCR结果准吗?要不要将转化子接LB液体提质粒后再做PCR鉴定啊?
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pidou213

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
菌落PCR不如提取质粒后再P的好
见得多爱的多
4楼2010-04-19 22:07:55
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-19 22:58
提取质粒后酶切结果最可靠,起码应该做一两次,验证一下菌落PCR的结果,菌落PCR特别容易污染,有的时候扩增失败也是常事
2楼2010-04-19 21:27:54
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

这样啊,谢谢指教,我试试吧
3楼2010-04-19 21:29:14
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sdluqun

铁杆木虫 (著名写手)

板砖队长

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1): 2010-04-19 23:01
我一般做的还好 用M13 Forward Primer和特异的Reverse Primer 基本都能得到目的条带
尔非我焉知我悲喜
5楼2010-04-19 22:59:18
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