| 查看: 265 | 回复: 1 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助/交流】求助蛋白表达的难题 已有1人参与
|
|||
|
大家好，本人最近在表达一个蛋白，蛋白全长大约有170KD,我用的是pdest系列的载体，之前我已经把载体做好了，然后转化bl21，之后小量诱导跑胶发现蛋白可能是降解或者是提前终止了，在100kd左右出现了我的目的蛋白（western检测）。之后我又重新把载体构建，重新转化了bl21，再次跑胶，western却什么也检测不到了。我比较奇诡的现象是我转化bl21后，小量诱导的时候，菌液先摇起来了，之后就开始澄清，菌体变成絮状，沉淀，过夜之后菌液又浑浊了，我是把过夜培养的菌转接后做的小量诱导。总之让人感觉怪怪的。 大家帮我分析分析是怎么回事？是我的蛋白自身的原因还是细胞的问题。有什么好的方法可以把这么大的蛋白表达出来。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有176人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
月月大可
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2010-04-16 00:08:35
