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馨沁

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也存在此问题,正分析原因
11楼2010-04-23 19:45:52
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shuwenying

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-24 00:35
是的,我们实验室以前也出现过类似的问题,大家也是换了各种试剂、甚至还装了紫外灯消毒什么的,都不行。
后来有个老师从国外回来的,也曾经遇见这种问题,国外的老板告诉她这是环境的问题,大家在同一个地方做的多了,气溶胶会污染环境的,一般来说没有什么办法,只能等几个月再做,就没事了。我们实验室也是这样的,等了将近三个月大家都不做,居然就莫名其妙地正常了。
你的实验急不急?要不然就安排实验室的人先做其他方面的实验,PCR就等1个月试试?
以上意见仅供参考啊
12楼2010-04-23 22:54:02
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

楼主是扩小片段么?小片段最容易被空气污染了,换个地方做试试。
我有一次检测克隆【500bp】也是假阳性,换了很多东西都不好,还洗了菌体之后再做菌落PCR。又以为是引物特异性不够好。郁闷的放了一个星期,然后就正常了
终于熬成木虫了……
13楼2010-04-24 06:41:20
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xpb2005

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by shuwenying at 2010-04-23 22:54:02:
是的,我们实验室以前也出现过类似的问题,大家也是换了各种试剂、甚至还装了紫外灯消毒什么的,都不行。
后来有个老师从国外回来的,也曾经遇见这种问题,国外的老板告诉她这是环境的问题,大家在同一个地方做的 ...

同意这种见解,环境问题最值得怀疑,你如果P完后放在同一个实验室跑胶,肯定要开盖检测,开盖时就有可能形成含有模板的气溶胶,做的次数多了就会把阴性模板污染,做出假阳性的结果。
14楼2010-04-24 15:35:24
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xpb2005

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议你先将超净工作台搽干净,用紫外灯照照,完了再超净工作台上配混合体系,加样时在台子外面加,如果检测能放在另一个房间最好。每次做完实验微升一定要搞好。
15楼2010-04-24 15:50:28
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gaiyf

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主是否检查了PCR管呢?pcr出现污染是很麻烦的事情,所以为了检验到底是什么出问题了,要一项一项的去排除,当初我就是为了解决污染的问题,足足进行了将近一个周的实验。
多看文献,多学知识
16楼2010-04-24 16:17:32
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yangzi0224

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-17 18:19:19:
污染,一般情况就是水,尤其像楼主说的,所有药都排查了,就是水最值得怀疑,国产水倒是问题不大,但是要常换常灭菌,而且瓶子一定要干净,用次氯酸钠泡好才行,另外,灭好的水最好超净台分装使用,不要总是开瓶用 ...

我们最近也有污染,最终怀疑到水,可是没有加水的空白对照可扩出,加过阴性对照模板的没有扩出,有些样品也扩不出,你说怎么解释呢?如果是水所有样品都能扩出,可是有些扩不出怎么说呢?很郁闷
17楼2012-02-29 18:07:11
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yangzi0224

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by gaiyf at 2010-04-24 16:17:32:
楼主是否检查了PCR管呢?pcr出现污染是很麻烦的事情,所以为了检验到底是什么出问题了,要一项一项的去排除,当初我就是为了解决污染的问题,足足进行了将近一个周的实验。

那16楼最终排除的结果是什么呢?
18楼2012-02-29 18:08:12
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wjjw1104

新虫 (初入文坛)

都毕业了
19楼2013-10-11 12:15:36
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