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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR污染判定
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wjjw1104

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR污染判定 已有15人参与

在阴性对照中扩出产物，所以这几天一直在寻找污染源，从引物到体系全部更换后，依然存在，于是我怀疑是枪的问题，用别人的枪做仍然能扩出条带，今天我又用了别人的酶做，因为我怀疑我们这批酶有问题，结果却是有模板和水都扩不出东西，且引物二聚体很亮，这是不是酶的特异性太差。
此外我还怀疑水有问题，我们的水是国产机器产出的纯净水，然后在自己灭菌一次。

情况就是这样，请各位指教
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1楼 2010-04-13 23:03:08
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xpb2005

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by shuwenying at 2010-04-23 22:54:02:
是的，我们实验室以前也出现过类似的问题，大家也是换了各种试剂、甚至还装了紫外灯消毒什么的，都不行。
后来有个老师从国外回来的，也曾经遇见这种问题，国外的老板告诉她这是环境的问题，大家在同一个地方做的 ...

同意这种见解，环境问题最值得怀疑，你如果P完后放在同一个实验室跑胶，肯定要开盖检测，开盖时就有可能形成含有模板的气溶胶，做的次数多了就会把阴性模板污染，做出假阳性的结果。
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14楼2010-04-24 15:35:24
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zhongy1985

木虫 (小有名气)
★
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最近我也老是遇到这样的问题，一直没有找到污染源，很是苦恼啊！
期待高手指教！
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2楼2010-04-13 23:10:10
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zrm1983

银虫 (小有名气)
★ ★
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scelab(金币+1): 2010-04-17 19:00
可以把loading buffer 换了试试
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3楼2010-04-17 11:09:43
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
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scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-17 19:00
引用回帖:
Originally posted by wjjw1104 at 2010-04-13 23:03:08:
在阴性对照中扩出产物，所以这几天一直在寻找污染源，从引物到体系全部更换后，依然存在，于是我怀疑是枪的问题，用别人的枪做仍然能扩出条带，今天我又用了别人的酶做，因为我怀疑我们这批酶有问题，结果却是有模 ...

楼主莫慌，可以尝试用百分之十的次氯酸钠擦拭实验桌面以及枪等，然后换用新的试剂盒，并将其与DNA分开放置。以后做实验小心一点，不要造成液体飞溅等等。试试吧，祝好运！
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不忘初心，为梦远行。
4楼2010-04-17 17:58:17
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