应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR污染判定
191/2返回列表12下一页
查看: 2421  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wjjw1104

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR污染判定 已有15人参与

在阴性对照中扩出产物，所以这几天一直在寻找污染源，从引物到体系全部更换后，依然存在，于是我怀疑是枪的问题，用别人的枪做仍然能扩出条带，今天我又用了别人的酶做，因为我怀疑我们这批酶有问题，结果却是有模板和水都扩不出东西，且引物二聚体很亮，这是不是酶的特异性太差。
此外我还怀疑水有问题，我们的水是国产机器产出的纯净水，然后在自己灭菌一次。

情况就是这样，请各位指教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-04-13 23:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongy1985

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

最近我也老是遇到这样的问题，一直没有找到污染源，很是苦恼啊！
期待高手指教！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-04-13 23:10:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zrm1983

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1): 2010-04-17 19:00
可以把loading buffer 换了试试
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-04-17 11:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-17 19:00
引用回帖:
Originally posted by wjjw1104 at 2010-04-13 23:03:08:
在阴性对照中扩出产物，所以这几天一直在寻找污染源，从引物到体系全部更换后，依然存在，于是我怀疑是枪的问题，用别人的枪做仍然能扩出条带，今天我又用了别人的酶做，因为我怀疑我们这批酶有问题，结果却是有模 ...

楼主莫慌，可以尝试用百分之十的次氯酸钠擦拭实验桌面以及枪等，然后换用新的试剂盒，并将其与DNA分开放置。以后做实验小心一点，不要造成液体飞溅等等。试试吧，祝好运！
赞一下(2人) 回复此楼
不忘初心，为梦远行。
4楼2010-04-17 17:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-17 19:00
污染，一般情况就是水，尤其像楼主说的，所有药都排查了，就是水最值得怀疑，国产水倒是问题不大，但是要常换常灭菌，而且瓶子一定要干净，用次氯酸钠泡好才行，另外，灭好的水最好超净台分装使用，不要总是开瓶用。

不知道楼主的模板是什么，细菌病毒质粒等，有的时候是空气污染
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-04-17 18:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moonblue789

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
会不会LZ的引物有问题，你看看引物合成纯化方式
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-04-22 17:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gn2003_0

金虫 (小有名气)
环境污染问题一般不大，我们做有时候都不在超净工作台。最有可能是你的水的问题，或者PCR反应体系中的成分有污染。
赞一下 回复此楼
7楼2010-04-23 14:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyde0706

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道你PCR产物检测区和操作区是否严格区分，产物积累到一定浓度，会在空气中形成气溶胶，一个气溶胶颗粒可以包含1000个copies的产物，还是可以形成污染的。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-04-23 16:38:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinoer

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
水的问题不是很大，还是从别的方面找原因
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-04-23 16:42:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lliuzhi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得你可以换一下酶，我之前P的就没有我需要的条带，反而引物二聚体特别亮，后来换了酶就好了
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-04-23 19:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wjjw1104 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+5 David1982 2026-10-13 8/400 2026-10-14 21:38 by lhw_GPA4.0
[硕博家园] 中科院海洋所招收海洋材料相关领域博士研究生及研究助理 +3 sujiner 2026-10-08 4/200 2026-10-14 20:40 by qicaiyun
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +3 xqy2009 2026-10-13 3/150 2026-10-14 20:17 by 43358052
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭