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pwj

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请大家帮我分析下原因 关于原核表达 已有6人参与

大家好!请高手帮忙分析下
我构建了一个PET30a表达载体,经过酶切、PCR都已经验证了。而且基因编码也没问题,但最近最诱导时,OD600为0.6后,加入IPTG就不怎么长了,而且无目的蛋白的表达,这是为什么啊?

我都诱导4小时后加SDS上样缓冲液,煮5分钟,然后上样

[ Last edited by pwj on 2010-4-9 at 21:11 ]
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DNAhelix

银虫 (著名写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-10 12:04
蛋白不表达问题真不好说。
1、用其他重组表达质粒测试下表达菌及操作有没有问题。
2、切换其它可表达蛋白测试下你的质粒或目的蛋白有没有问题。
智慧活法:不生气,不计较!
2楼2010-04-09 22:45:30
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