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pwj

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请大家帮我分析下原因 关于原核表达已有6人参与

大家好!请高手帮忙分析下
我构建了一个PET30a表达载体,经过酶切、PCR都已经验证了。而且基因编码也没问题,但最近最诱导时,OD600为0.6后,加入IPTG就不怎么长了,而且无目的蛋白的表达,这是为什么啊?

我都诱导4小时后加SDS上样缓冲液,煮5分钟,然后上样

[ Last edited by pwj on 2010-4-9 at 21:11 ]
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acaifeng

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
表达量较少时蛋白胶上看不见明显的条带,可以做western blot检测一下。
8楼2010-04-12 09:12:38
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