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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】没想到考马斯亮蓝空白吸光度这么大！！
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fwrq

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】没想到考马斯亮蓝空白吸光度这么大！！ 已有6人参与

原来还不知道，最近做了个小实验才发现：
用蒸馏水调零，595 nm下考马斯亮蓝试剂吸光度居然达到0.7-0.8！
由此我就有个疑问：这么大的空白吸光度对测定会不会产生较大的误差？
我想，考马斯必须是大大过量的，这样每个样的背景值才会基本一致。
请教：
1、大家有没有试试，用蒸馏水调零，空白样的吸光度是多少？
2、做蛋白质测定时，线性范围内的最大吸光度是多少（减去空白以后）？

谢谢！

[ Last edited by fwrq on 2010-4-8 at 18:32 ]
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1楼 2010-04-08 15:58:27
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weiyanbme

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 18:45
fwrq(金币+2): 2010-05-06 17:31:10
lZ说的问题我也遇到过的，确实在0.8左右了，我做的标准曲线怎么看怎么觉得很别扭，不知道该怎么办
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2楼2010-04-08 17:44:47
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fwrq

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by weiyanbme at 2010-04-08 17:44:47:
lZ说的问题我也遇到过的，确实在0.8左右了，我做的标准曲线怎么看怎么觉得很别扭，不知道该怎么办

希望有高人给予解答！
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3楼2010-04-08 18:33:27
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千与千寻小寻

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
scelab(金币+3):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 23:38
fwrq(金币+1):提供了好思路，但我是过滤的，吸光度仍比较大。 2010-04-09 11:01
前几天刚做过，，是0.3左右。。是不是没有过滤直接拿来测了
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学想要学的，做要想做的，GO!
4楼2010-04-08 20:02:52
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weiyanbme

木虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-08 23:38
对的，是没有过滤，觉得影响不大就没过滤，看来还是要严谨，试一试先，谢谢了
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5楼2010-04-08 23:17:01
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
晕死，谁教的你用水调零啊
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6楼2010-04-09 08:19:09
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fwrq

新虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):有道理 2010-04-09 12:44
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-04-09 08:19:09:
晕死，谁教的你用水调零啊

ls，不要以为用空白调零就是解决了问题。如果空白吸光度很大的话，会影响灵敏度的。假设空白吸光度就有1，你用空白来调零，会不会影响测定的准确度呢？
在光度法中，空白样的吸光度越小越好的。
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7楼2010-04-09 08:24:09
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fwrq

新虫 (正式写手)
大家线性范围的最大吸光度是多少啊？（减去空白后）
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8楼2010-04-09 11:04:46
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lf0539

木虫 (著名写手)
原来如此！
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9楼2010-04-19 12:57:15
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by fwrq at 2010-04-09 08:24:09:

ls，不要以为用空白调零就是解决了问题。如果空白吸光度很大的话，会影响灵敏度的。假设空白吸光度就有1，你用空白来调零，会不会影响测定的准确度呢？
在光度法中，空白样的吸光度越小越好的。

……
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10楼2010-04-19 13:17:55
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