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fwrq

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】没想到考马斯亮蓝空白吸光度这么大!!已有6人参与

原来还不知道,最近做了个小实验才发现:
用蒸馏水调零,595 nm下考马斯亮蓝试剂吸光度居然达到0.7-0.8!
由此我就有个疑问:这么大的空白吸光度对测定会不会产生较大的误差?
我想,考马斯必须是大大过量的,这样每个样的背景值才会基本一致。
请教:
1、大家有没有试试,用蒸馏水调零,空白样的吸光度是多少?
2、做蛋白质测定时,线性范围内的最大吸光度是多少(减去空白以后)?

谢谢!

[ Last edited by fwrq on 2010-4-8 at 18:32 ]
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weiyanbme

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-08 18:45
fwrq(金币+2): 2010-05-06 17:31:10
lZ说的问题我也遇到过的,确实在0.8左右了,我做的标准曲线怎么看怎么觉得很别扭,不知道该怎么办
2楼2010-04-08 17:44:47
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fwrq

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by weiyanbme at 2010-04-08 17:44:47:
lZ说的问题我也遇到过的,确实在0.8左右了,我做的标准曲线怎么看怎么觉得很别扭,不知道该怎么办

希望有高人给予解答!
3楼2010-04-08 18:33:27
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千与千寻小寻

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
scelab(金币+3):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-08 23:38
fwrq(金币+1):提供了好思路,但我是过滤的,吸光度仍比较大。 2010-04-09 11:01
前几天刚做过,,是0.3左右。。是不是没有过滤直接拿来测了
学想要学的,做要想做的,GO!
4楼2010-04-08 20:02:52
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weiyanbme

木虫 (正式写手)

★ ★
scelab(金币+2):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-08 23:38
对的,是没有过滤,觉得影响不大就没过滤,看来还是要严谨,试一试先,谢谢了
5楼2010-04-08 23:17:01
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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晕死,谁教的你用水调零啊
6楼2010-04-09 08:19:09
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fwrq

新虫 (正式写手)


scelab(金币+1):有道理 2010-04-09 12:44
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-04-09 08:19:09:
晕死,谁教的你用水调零啊

ls,不要以为用空白调零就是解决了问题。如果空白吸光度很大的话,会影响灵敏度的。假设空白吸光度就有1,你用空白来调零,会不会影响测定的准确度呢?
在光度法中,空白样的吸光度越小越好的。
7楼2010-04-09 08:24:09
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fwrq

新虫 (正式写手)

大家线性范围的最大吸光度是多少啊?(减去空白后)
8楼2010-04-09 11:04:46
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lf0539

木虫 (著名写手)

原来如此!
9楼2010-04-19 12:57:15
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

引用回帖:
Originally posted by fwrq at 2010-04-09 08:24:09:

ls,不要以为用空白调零就是解决了问题。如果空白吸光度很大的话,会影响灵敏度的。假设空白吸光度就有1,你用空白来调零,会不会影响测定的准确度呢?
在光度法中,空白样的吸光度越小越好的。

……
10楼2010-04-19 13:17:55
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