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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】ＨＰＬＣ做标准曲线出现肩峰
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xiyou1985

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】ＨＰＬＣ做标准曲线出现肩峰 已有5人参与

最近在做标准曲线的时候出现肩峰，请问大家是什么原因造成的？
具体操作情况是这样的：
流动相是甲醇+水
１ml/ｍｉｎ的流速。检测时泵压１４０左右。
一个样品，分２微升，４微升，６微升，８微升，１０微升，１２微升等不同的进样量进行进样。
肩峰的出现总是在６微升及以后的８微升等进样量比较大的时候出现，在前面进样量比较小的２，４微升的时候，峰型非常好。
我尝试调整不同流动相比例，用过甲醇：水从２５：７５到３０：７０到４０：６０到５０：５０到７５：２５。甲醇少的时候，出峰比较晚，十分钟左右，但同时肩峰还是会在６及以后的进样大的时候出现。甲醇多的时候，出峰在３分钟左右，肩峰也会在６及以后的进样量大的时候出现。

请问，这到底是怎么一回事？因为实验室师兄师姐都已经毕业，他们也不会换柱子，到我用的时候，没人教我换柱子，我也不会换。

所以希望大家尽量能找出一些非柱子的原因以便我来一一尝试。

非常感谢。
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1楼 2010-04-02 21:23:38
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ccbright1016

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
平衡时间不够 手动进样还是自动进样？
定量环是多少的啊
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2楼2010-04-02 23:56:33
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xiyou1985

银虫 (小有名气)
自动进样，什么是定量环啊？
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3楼2010-04-03 09:30:00
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xkp123

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wingcat(金币+1):谢谢 2010-04-04 22:54
估计是PH不对，导致你的样品以几种形式存在，所以进样量大时出现尖峰，你调下PH吧
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4楼2010-04-03 10:00:04
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
★
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引用回帖:
Originally posted by xiyou1985 at 2010-04-02 21:23:38:
最近在做标准曲线的时候出现肩峰，请问大家是什么原因造成的？
具体操作情况是这样的：
流动相是甲醇+水
１ml/ｍｉｎ的流速。检测时泵压１４０左右。
一个样品，分２微升，４微升，６微升，８微升，１０微升， ...

可能是样品浓度过高，当进样量加大时超出柱容量！！
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我为新生
5楼2010-04-03 10:04:21
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zzn1984

铜虫 (小有名气)

同意

★
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Originally posted by happy169 at 2010-04-03 10:04:21:

可能是样品浓度过高，当进样量加大时超出柱容量！！

我也赞同
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坚持
6楼2010-04-03 10:19:35
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xiyou1985

银虫 (小有名气)
谢谢大伙的帮忙，我去换个稀点的做下试试，谢谢阿。
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7楼2010-04-03 10:50:45
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xiyou1985

银虫 (小有名气)
刚刚试了一下，稀释到昨天的四分之一浓度，进样１０微升，甲醇比水３０：７０，在十分钟左右的时候峰还是连在一起，怎么解决阿？

这是标准品，葛根素，我是直接用９５国药乙醇溶的，不应该存在ｐＨ的问题吧？
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8楼2010-04-03 13:46:13
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiyou1985 at 2010-04-03 13:46:13:
刚刚试了一下，稀释到昨天的四分之一浓度，进样１０微升，甲醇比水３０：７０，在十分钟左右的时候峰还是连在一起，怎么解决阿？

这是标准品，葛根素，我是直接用９５国药乙醇溶的，不应该存在ｐＨ的问题吧？

楼主为什么不按照我说的试试呢？
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9楼2010-04-03 13:54:24
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xiyou1985

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xkp123 at 2010-04-03 10:00:04:
估计是PH不对，导致你的样品以几种形式存在，所以进样量大时出现尖峰，你调下PH吧

这个怎么调呢？我用的葛根素直接用乙醇溶的。用什么来调pＨ值呢？调到多少？
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10楼2010-04-03 14:25:38
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