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xiyou1985

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC做标准曲线出现肩峰 已有5人参与

最近在做标准曲线的时候出现肩峰,请问大家是什么原因造成的?
具体操作情况是这样的:
流动相是甲醇+水
1ml/min的流速。检测时泵压140左右。
一个样品,分2微升,4微升,6微升,8微升,10微升,12微升等不同的进样量进行进样。
肩峰的出现总是在6微升及以后的8微升等进样量比较大的时候出现,在前面进样量比较小的2,4微升的时候,峰型非常好。
我尝试调整不同流动相比例,用过甲醇:水从25:75到30:70到40:60到50:50到75:25。甲醇少的时候,出峰比较晚,十分钟左右,但同时肩峰还是会在6及以后的进样大的时候出现。甲醇多的时候,出峰在3分钟左右,肩峰也会在6及以后的进样量大的时候出现。

请问,这到底是怎么一回事?因为实验室师兄师姐都已经毕业,他们也不会换柱子,到我用的时候,没人教我换柱子,我也不会换。

所以希望大家尽量能找出一些非柱子的原因以便我来一一尝试。

非常感谢。
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xiyou1985

银虫 (小有名气)

自动进样,什么是定量环啊?
3楼2010-04-03 09:30:00
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ccbright1016

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
平衡时间不够 手动进样还是自动进样?
定量环是多少的啊
2楼2010-04-02 23:56:33
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xkp123

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wingcat(金币+1):谢谢 2010-04-04 22:54
估计是PH不对,导致你的样品以几种形式存在,所以进样量大时出现尖峰,你调下PH吧
4楼2010-04-03 10:00:04
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiyou1985 at 2010-04-02 21:23:38:
最近在做标准曲线的时候出现肩峰,请问大家是什么原因造成的?
具体操作情况是这样的:
流动相是甲醇+水
1ml/min的流速。检测时泵压140左右。
一个样品,分2微升,4微升,6微升,8微升,10微升, ...

可能是样品浓度过高,当进样量加大时超出柱容量!!
我为新生
5楼2010-04-03 10:04:21
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