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【求助】ＨＰＬＣ做标准曲线出现肩峰 已有5人参与
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最近在做标准曲线的时候出现肩峰，请问大家是什么原因造成的？ 具体操作情况是这样的： 流动相是甲醇+水 １ml/ｍｉｎ的流速。检测时泵压１４０左右。 一个样品，分２微升，４微升，６微升，８微升，１０微升，１２微升等不同的进样量进行进样。 肩峰的出现总是在６微升及以后的８微升等进样量比较大的时候出现，在前面进样量比较小的２，４微升的时候，峰型非常好。 我尝试调整不同流动相比例，用过甲醇：水从２５：７５到３０：７０到４０：６０到５０：５０到７５：２５。甲醇少的时候，出峰比较晚，十分钟左右，但同时肩峰还是会在６及以后的进样大的时候出现。甲醇多的时候，出峰在３分钟左右，肩峰也会在６及以后的进样量大的时候出现。 请问，这到底是怎么一回事？因为实验室师兄师姐都已经毕业，他们也不会换柱子，到我用的时候，没人教我换柱子，我也不会换。 所以希望大家尽量能找出一些非柱子的原因以便我来一一尝试。 非常感谢。 |
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