24小时热门版块排行榜    

查看: 926  |  回复: 8
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 w.king124 的 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】提取pET32-a(+)质粒,量很低是菌株退化导致拷贝数下降吗(急)

如题,手提质粒pET32-a+(300ml细菌培养液,12h培养),提了几次都是产量很低,但是同时提的其他质粒量却很大,说明提取手法应该没有什么问题(提过很多次,手艺很成熟,),那么现在问题是:这种情况是不是由于菌株退化导致的质粒拷贝数下降???
如果我用提取得到的质粒转化DH5阿尔法感受态细胞,得到的菌会恢复高拷贝吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)


sutao1979(金币+1): 2010-03-30 21:40
按照你说的重新转化DH5a,估计应该可以解决
3楼2010-03-30 21:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

wordsworth3180

木虫 (正式写手)

你是在什么宿主菌中提得质粒啊?这个会有影响的吧!
2楼2010-03-30 21:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-03-30 21:28:03:
你是在什么宿主菌中提得质粒啊?这个会有影响的吧!

这个菌株是别的实验室赠的,应该也是在DH5阿尔法吧
4楼2010-03-30 21:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by ilaveu at 2010-03-30 21:31:59:
按照你说的重新转化DH5a,估计应该可以解决

本来可以做的,但是现在时间比较紧,就是不想浪费时间,想请遇到过这种情况的介绍一下经验,节省点时间,呵呵
5楼2010-03-30 21:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层,如同你们一样大部分普通教师忙且收入低 +10 瞬息宇宙 2026-02-20 13/650 2026-02-23 11:23 by holypower
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 8rmuugja8q 2026-02-22 7/350 2026-02-23 09:44 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:35 by w4l55oybr1
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:29 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 usprnugpzw 2026-02-21 11/550 2026-02-23 09:24 by w4l55oybr1
[教师之家] 为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊,但还是做不出宇树机器人? +5 欢乐颂叶蓁 2026-02-21 8/400 2026-02-23 09:19 by 欢乐颂叶蓁
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 w89i99eaeh 2026-02-22 5/250 2026-02-23 08:04 by w4l55oybr1
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 6/300 2026-02-23 07:59 by w4l55oybr1
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +6 3dfhjxgsh7 2026-02-22 9/450 2026-02-23 07:49 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 4/200 2026-02-23 06:46 by jsjzfl
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 5/250 2026-02-23 06:29 by w4l55oybr1
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 06:24 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 3dfhjxgsh7 2026-02-22 6/300 2026-02-23 02:04 by 5jlh3qtdvx
[教师之家] 版面费该交吗 +7 苹果在哪里 2026-02-22 8/400 2026-02-22 22:37 by otani
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 usprnugpzw 2026-02-21 6/300 2026-02-22 19:48 by w89i99eaeh
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 3dfhjxgsh7 2026-02-22 4/200 2026-02-22 16:52 by khieu8v8m0
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-22 3/150 2026-02-22 16:37 by khieu8v8m0
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-21 4/200 2026-02-22 16:27 by khieu8v8m0
[基金申请] “人文社科而论,许多学术研究还没有达到民国时期的水平” +4 苏东坡二世 2026-02-18 5/250 2026-02-22 16:07 by liangep1573
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +11 瞬息宇宙 2026-02-16 12/600 2026-02-21 21:14 by lq493392203
信息提示
请填处理意见