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含笑天天银虫 (正式写手)
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【求助】纳豆激酶活性测定 已有9人参与
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各位高手大家好，我检测纳豆激酶活性是用纤维蛋白平办法： 10 ml纤维蛋白原溶液（1.2 mg/ml 纤维蛋白原，50 mM 巴比妥钠，90 mM NaCl，1.7 mM CaCl2，0.7 mM MgCl2，pH 7.75)，10 ml 琼脂糖溶液（0.8%），分别在55°C水浴中温浴，向琼脂糖溶液中加入1 BP凝血酶溶液（溶在10μl巴比妥钠）。纤维蛋白原溶液和琼脂糖溶液在100 mm平皿中混合于室温放置1 h形成纤维蛋白块，打孔，点样10 μl酶液，37温浴18 h，以尿激酶（100、 80、 60、 40、 20 U/ml）为标准制作标准曲线，计算纳豆激酶的酶活。 问题出现在尿激酶标准曲线的制作上，上次做直接点尿激酶都没有溶解圈。后来发现尿激酶通过作用于纤维蛋白溶酶原从而发挥作用，为什么我看到的文献上，在做纤维蛋白平板的时候都没提到纤维蛋白溶酶原溶液那？？不知道大家做的时候纤维蛋白溶酶原是什么时候加的？请高手赐教 |
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4楼2010-03-26 12:33:40