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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 暗星 at 2010-03-25 20:23:21:
我觉得是你的银染有点问题，我们一般都是在乙酸加一些乙醇，而且你的甲醛不要和硝酸银一起加，等到银染完了，有蒸馏水洗后，和氢氧化钠一起加进去！

你用的方法和楼主的也不一样，你用的是氢氧化钠显色法，他用的是碳酸钠，他的这种方法，比较慢，但是背景浅，灵敏度高，你的方法适合快速检测
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11楼2010-03-25 21:13:04
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zyj053

金虫 (初入文坛)
硝酸银是我才买的 100g价钱是320元 很贵了
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12楼2010-03-25 21:18:54
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zyj053

金虫 (初入文坛)
我每次都是现用现配的硝酸银 0.1%的是不是浓度有点低？
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13楼2010-03-25 21:20:56
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zyj053

金虫 (初入文坛)
我这次没漂洗 以前做的用蒸馏水漂洗 也不行  他们建议我用超纯水 我刚买的去离子水再试试
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14楼2010-03-25 21:22:44
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lansha8331

无虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-25 21:11:35:

你的用的是碳酸钠显色法？这个方法不应该是五分钟就够了，你用的是氢氧化钠的方法吧

恩，对，之前跑小胶用的是强碱法，五分钟一步，非变性胶。变性胶我也跑过，用的碳酸钠弱碱法，每步就得半小时了。但是我试验也跟楼主出现白板，条带弱的时候是强碱法的时候呵呵
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15楼2010-03-29 11:33:49
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lansha8331 at 2010-03-29 11:33:49:




恩，对，之前跑小胶用的是强碱法，五分钟一步，非变性胶。变性胶我也跑过，用的碳酸钠弱碱法，每步就得半小时了。但是我试验也跟楼主出现白板，条带弱的时候是强碱法的时候呵呵

我感觉白板就是硝酸银的问题，当然甲醛要是失效了也不行，但一般都硝酸银浓度或者质量问题
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16楼2010-03-29 11:59:42
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lansha8331

无虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-29 11:59:42:


我感觉白板就是硝酸银的问题，当然甲醛要是失效了也不行，但一般都硝酸银浓度或者质量问题

恩差不多吧，我的硝酸银前后换过两三瓶，，都是用新的，旧的压根不敢用，怕一大块胶又全给废了
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17楼2010-03-29 16:56:01
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
是不是你的显影液出问题了。
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望大家都各有所获！
18楼2010-03-29 19:08:09
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liuhua703

木虫 (正式写手)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
觉得是你的银染有点问题，而且你的甲醛不要和硝酸银一起加，等到银染完了，有蒸馏水洗后，和氢氧化钠一起加进去！ 我一直这样做的，效果不错，硝酸银或甲醛浓度低时会很慢。
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19楼2010-03-30 19:28:12
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