24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1431  |  回复: 18
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 zyj053 的 1 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染

我用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA,这是银染之后的条带。我所用的银染方法是:凝胶浸泡于10%冰醋酸中固定20min,以0.1%AgNO3溶液(含0.056%甲醛)浸泡30min,然后将凝胶置入预冷(4℃-10℃)的Na2CO3显影液中显色5-15min后,加入10%冰醋酸定影5min。但是我在显影液里放了30min,还是没有看到条带,放了一夜第二天早上才有东西,照片是我银染后,第二天拍的。请大虾们帮我看看那里出问题啦!急用,非常感谢!!!!!!!!!

[img]http://[/img]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by lansha8331 at 2010-03-29 11:33:49:




恩,对,之前跑小胶用的是强碱法,五分钟一步,非变性胶。变性胶我也跑过,用的碳酸钠弱碱法,每步就得半小时了。但是我试验也跟楼主出现白板,条带弱的时候是强碱法的时候呵呵

我感觉白板就是硝酸银的问题,当然甲醛要是失效了也不行,但一般都硝酸银浓度或者质量问题
16楼2010-03-29 11:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

cyjwx123

铁虫 (小有名气)


zyj053(金币+1):谢谢参与
zyj053(金币+1): 2010-03-24 19:57
我染色糖基化蛋白质的时候也出现了同样的问题,按照理论来讲银染过程比其他染色的方法都要复杂,然而敏感程度应该很高,但是结果却发现不是很敏感,我建议你换下试剂吧,比如用公司生产的试剂盒试下~
看的开才是真本事~
2楼2010-03-24 18:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)

你说用什么试剂盒?染色试剂盒?
3楼2010-03-24 19:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


zyj053(金币+1):谢谢参与
怀疑你的硝酸银浓度有问题,你配制的是0.1%的吗?
另外我记得你这种染色配方好像在显色液里也加有甲醛,千分之三的浓度
4楼2010-03-24 20:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 22专硕求调剂 +6 haoyun上岸 2026-04-11 8/400 2026-04-11 23:21 by labixiaoqiao
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-06 8/400 2026-04-11 20:25 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-08 6/300 2026-04-10 11:02 by mattzhming
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 专硕0854初试考材科基,求调剂 +7 3220548044 2026-04-06 10/500 2026-04-08 21:59 by hypershenger
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 机械工程264学硕求调剂 +3 qiushangxian 2026-04-06 3/150 2026-04-08 01:53 by Linzejun
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见