应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染
191/2返回列表12下一页
查看: 1365  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 zyj053 的 1 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

zyj053

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染

我用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA，这是银染之后的条带。我所用的银染方法是：凝胶浸泡于10%冰醋酸中固定20min，以0.1%AgNO3溶液（含0.056%甲醛）浸泡30min，然后将凝胶置入预冷（4℃-10℃）的Na2CO3显影液中显色5-15min后，加入10%冰醋酸定影5min。但是我在显影液里放了30min，还是没有看到条带，放了一夜第二天早上才有东西，照片是我银染后，第二天拍的。请大虾们帮我看看那里出问题啦！急用，非常感谢！！！！！！！！！

[img]http://[/img]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-24 17:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyjwx123

铁虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
zyj053(金币+1): 2010-03-24 19:57
我染色糖基化蛋白质的时候也出现了同样的问题，按照理论来讲银染过程比其他染色的方法都要复杂，然而敏感程度应该很高，但是结果却发现不是很敏感，我建议你换下试剂吧，比如用公司生产的试剂盒试下~
赞一下(1人) 回复此楼
看的开才是真本事~
2楼2010-03-24 18:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)
你说用什么试剂盒？染色试剂盒？
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-24 19:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
怀疑你的硝酸银浓度有问题，你配制的是0.1%的吗？
另外我记得你这种染色配方好像在显色液里也加有甲醛，千分之三的浓度
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-24 20:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)
是啊 我新买的硝酸银 按体积比配的 100ml里0.1g硝酸银 用之前加的甲醛
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-25 10:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
我筛选分子标记的时候做过，固定，染色，显色每步基本都是五分钟搞定，很快的，条带也很黑。你这也确实有点慢，，，估计是硝酸银的问题吧，我的放久了也很难染出来。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-03-25 13:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
提高硝酸银和甲醛的浓度

硝酸银用几次就不行了
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-03-25 18:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
每次A溶液换成B溶液都要用水洗
洗个3×5min
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-03-25 18:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暗星

银虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
我觉得是你的银染有点问题，我们一般都是在乙酸加一些乙醇，而且你的甲醛不要和硝酸银一起加，等到银染完了，有蒸馏水洗后，和氢氧化钠一起加进去！
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-03-25 20:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lansha8331 at 2010-03-25 13:50:43:
我筛选分子标记的时候做过，固定，染色，显色每步基本都是五分钟搞定，很快的，条带也很黑。你这也确实有点慢，，，估计是硝酸银的问题吧，我的放久了也很难染出来。

你的用的是碳酸钠显色法？这个方法不应该是五分钟就够了，你用的是氢氧化钠的方法吧
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-03-25 21:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zyj053 的主题更新
191/2返回列表12下一页
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂（0805） +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭