应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染
191/2返回列表12下一页
查看: 1529  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 zyj053 的 1 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

zyj053

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染

我用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA，这是银染之后的条带。我所用的银染方法是：凝胶浸泡于10%冰醋酸中固定20min，以0.1%AgNO3溶液（含0.056%甲醛）浸泡30min，然后将凝胶置入预冷（4℃-10℃）的Na2CO3显影液中显色5-15min后，加入10%冰醋酸定影5min。但是我在显影液里放了30min，还是没有看到条带，放了一夜第二天早上才有东西，照片是我银染后，第二天拍的。请大虾们帮我看看那里出问题啦！急用，非常感谢！！！！！！！！！

[img]http://[/img]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-24 17:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyjwx123

铁虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
zyj053(金币+1): 2010-03-24 19:57
我染色糖基化蛋白质的时候也出现了同样的问题，按照理论来讲银染过程比其他染色的方法都要复杂，然而敏感程度应该很高，但是结果却发现不是很敏感，我建议你换下试剂吧，比如用公司生产的试剂盒试下~
赞一下(1人) 回复此楼
看的开才是真本事~
2楼2010-03-24 18:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)
你说用什么试剂盒？染色试剂盒？
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-24 19:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
怀疑你的硝酸银浓度有问题，你配制的是0.1%的吗？
另外我记得你这种染色配方好像在显色液里也加有甲醛，千分之三的浓度
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-24 20:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)
是啊 我新买的硝酸银 按体积比配的 100ml里0.1g硝酸银 用之前加的甲醛
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-25 10:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
我筛选分子标记的时候做过，固定，染色，显色每步基本都是五分钟搞定，很快的，条带也很黑。你这也确实有点慢，，，估计是硝酸银的问题吧，我的放久了也很难染出来。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-03-25 13:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
提高硝酸银和甲醛的浓度

硝酸银用几次就不行了
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-03-25 18:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
每次A溶液换成B溶液都要用水洗
洗个3×5min
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-03-25 18:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暗星

银虫 (小有名气)
★
zyj053(金币+1):谢谢参与
我觉得是你的银染有点问题，我们一般都是在乙酸加一些乙醇，而且你的甲醛不要和硝酸银一起加，等到银染完了，有蒸馏水洗后，和氢氧化钠一起加进去！
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-03-25 20:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lansha8331 at 2010-03-25 13:50:43:
我筛选分子标记的时候做过，固定，染色，显色每步基本都是五分钟搞定，很快的，条带也很黑。你这也确实有点慢，，，估计是硝酸银的问题吧，我的放久了也很难染出来。

你的用的是碳酸钠显色法？这个方法不应该是五分钟就够了，你用的是氢氧化钠的方法吧
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-03-25 21:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zyj053 的主题更新
191/2返回列表12下一页
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 别被青基扩招骗了！26年科研内卷才刚刚开始 +3 国自然国社科中 2026-05-14 4/200 2026-05-19 08:48 by archvillain
[考博] 找博士生导师 +5 小代想上岸 2026-05-15 6/300 2026-05-19 08:28 by zhyzzh
[基金申请] 国自然上会要求 +5 无名者登山 2026-05-18 9/450 2026-05-18 17:50 by BlakeReary
[基金申请] 今年审到国自然15份，谈谈感受 +16 国自然国社科中 2026-05-17 16/800 2026-05-18 14:58 by gy116024
[基金申请] 青C资助名额大幅增加！ +12 西葫芦炒鸡蛋 2026-05-13 16/800 2026-05-18 10:02 by Equinoxhua
[基金申请] 重磅！青年科学基金项目（C类）资助增幅预计超过50% +7 水和泥不是水泥 2026-05-13 10/500 2026-05-18 07:50 by 水和泥不是水泥
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 l7k6xnh0yc 2026-05-14 5/250 2026-05-17 19:39 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 xx7gd5zq4e 2026-05-15 6/300 2026-05-17 19:36 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 v9tggjlwd0 2026-05-15 4/200 2026-05-17 08:06 by 11n4dfd8yn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-17 07:31 by 11n4dfd8yn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 l7k6xnh0yc 2026-05-14 8/400 2026-05-17 07:26 by 11n4dfd8yn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-17 07:11 by 11n4dfd8yn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ky2p12rrjj 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:50 by ue3ir18jc3
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:35 by ue3ir18jc3
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:25 by ue3ir18jc3
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-16 17:45 by j6b2pdz07o
[有机交流] 求有机合成大神指点三硫酸乙烯酯（CAS：2793408-99-6）的合成路线 30+3 Leekmid 2026-05-13 10/500 2026-05-16 16:37 by czyzsu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k37jurhrau 2026-05-16 3/150 2026-05-16 13:57 by vcdazktkjx
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
[考博] 26应届毕业生考博求助 +3 wo一定上岸 2026-05-13 3/150 2026-05-14 21:47 by 明海天涯
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭