24小时热门版块排行榜    

查看: 1780  |  回复: 18
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 zyj053 的 1 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA银染

我用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA,这是银染之后的条带。我所用的银染方法是:凝胶浸泡于10%冰醋酸中固定20min,以0.1%AgNO3溶液(含0.056%甲醛)浸泡30min,然后将凝胶置入预冷(4℃-10℃)的Na2CO3显影液中显色5-15min后,加入10%冰醋酸定影5min。但是我在显影液里放了30min,还是没有看到条带,放了一夜第二天早上才有东西,照片是我银染后,第二天拍的。请大虾们帮我看看那里出问题啦!急用,非常感谢!!!!!!!!!

[img]http://[/img]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 暗星 at 2010-03-25 20:23:21:
我觉得是你的银染有点问题,我们一般都是在乙酸加一些乙醇,而且你的甲醛不要和硝酸银一起加,等到银染完了,有蒸馏水洗后,和氢氧化钠一起加进去!

你用的方法和楼主的也不一样,你用的是氢氧化钠显色法,他用的是碳酸钠,他的这种方法,比较慢,但是背景浅,灵敏度高,你的方法适合快速检测
11楼2010-03-25 21:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

cyjwx123

铁虫 (小有名气)


zyj053(金币+1):谢谢参与
zyj053(金币+1): 2010-03-24 19:57
我染色糖基化蛋白质的时候也出现了同样的问题,按照理论来讲银染过程比其他染色的方法都要复杂,然而敏感程度应该很高,但是结果却发现不是很敏感,我建议你换下试剂吧,比如用公司生产的试剂盒试下~
看的开才是真本事~
2楼2010-03-24 18:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyj053

金虫 (初入文坛)

你说用什么试剂盒?染色试剂盒?
3楼2010-03-24 19:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


zyj053(金币+1):谢谢参与
怀疑你的硝酸银浓度有问题,你配制的是0.1%的吗?
另外我记得你这种染色配方好像在显色液里也加有甲醛,千分之三的浓度
4楼2010-03-24 20:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +19 医学老男孩 2026-08-13 43/2150 2026-08-14 13:34 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 13/650 2026-08-14 10:53 by lnjx2024
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见