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【求助/交流】GUS染色具体步骤
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| 如题，现在准备做GUS标记基因检测，请教大家，具体实验步骤，越详尽越好，谢谢大家的帮助！ |
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 实验技术、方法交流 |
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3楼2010-03-24 11:11:44
wangxiaoguo
木虫 (正式写手)
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- 专业: 植物生理与生化
liyang107(金币+5): 2010-03-30 19:43
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GUS基因检测 仪器设备：恒温箱、超净工作台 器具：1.5ml的塑料管、镊子、解剖刀等 材料：转化的愈伤组织 试剂及其配制： 50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。 B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶100ml。取A液39ml与B 液61ml混合，定容至400ml，调PH至7.0。 50mmol/L铁氰化钾母液：称3.295g，用蒸馏水定容至200ml 50mmol/l亚铁氰化钾母液：称4.224g ，用蒸馏水定容至200ml。 0.5mol/l EDTA母液（pH8.0）： 药品 分子量 100ml 500ml EDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g 双蒸H2O 80ml 400ml 用NaOH调PH至8.0 6g 10g DdH2O定容至 100ml 500ml GUS检测液的配制：甲醇、Gluc、DMF 100mgGluc，先溶于1ml的DMF。取80ml 50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0），加入1ml 50mmol/L铁氰化钾、1ml 50mmol/L亚铁氰化钾和2ml 0.5mol/l EDTA（PH 8.0），再加入已溶解的Gluc，再加20ml的甲醇，混匀。（配制方法参考《现代植物生理学实验指南》p348） 将配好的GUS检测液分装于1.5ml的塑料管中（1ml/管，1组1管），－20°C保存备用。 具体要看你检测什么基因了！！ |
2楼2010-03-23 00:18:05
fungixx
至尊木虫 (文坛精英)
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liyang107(金币+5): 2010-03-30 19:43
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你看看这个protocal吧，挺全的（包括GUS组织化学检测和荧光活性检测） http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=8595394gromjo3hamkhb552 |
4楼2010-03-25 08:36:54