24小时热门版块排行榜    

查看: 1145  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yafang21

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助(SOS)分子标记

最近在做一个分子标记,前面几个样PCR之后,PAGE的条带非常好,但是后面几个样不知道什么原因,根本就没有条带。甚是郁闷!刚开始怀疑是PCR仪的问题,但是在不同的PCR仪上的结果是一样的,都没有条带;用琼脂糖凝胶电泳判断是否是DNA的问题,但是发现DNA的条带非常清楚,并不是这个问题;PCR换了新的引物之后,还是没有条带;连之前做的有结果的样现在都没有条带了,能看到的就是marker一条带,说明染色也不是问题。现在真的很郁闷,哪位高手大侠能出面相救啊?不甚感激!

[ Last edited by 1949stone on 2010-3-21 at 08:48 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uutree

铜虫 (小有名气)

yafang21(金币+1):换过酶和dNTP了,但是还是没有条带 2010-03-21 12:17
Taq酶或是dNTP出问题了
3楼2010-03-21 10:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)


yafang21(金币+1):3q 2010-03-20 22:33
1949stone(金币+1): 2010-03-21 08:48
百分之八十以上的可能还是模板问题,应该不是质量问题,是模板浓度的问题,做个浓度梯度吧
2楼2010-03-20 19:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)

yafang21(金币+1):重新把该灭菌的都灭了,还是没有条带,伤心死了,不知道原因在哪里,指能换其他引物了 2010-03-23 23:09
我以前也遇到过这种情况,很恼人的。尤其筛选分子标记这种重复性实验,做着做着就出不来带了。唯一的方法只能把实验停下来,一个成分一个成分的检查,Taq,dNTP,引物,模板,甚至ddH2O都有可能出问题,我有一次找了半天原因把水费完了,重新拿了一瓶水,问题就解决了————就这么简单。重要的是要有找问题的耐心,,,呵呵
4楼2010-03-22 10:56:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

薄荷女

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励交流经验 2011-04-19 00:05:50
我也出现过哦!筛选引物的时候还是可以的,引物筛选做完,开始进行全部DNA聚丙烯酰胺凝胶的时候,发现原来很好的引物,后来一条带都没有了。样品是一样加入的,就连模板还是一个管的,DD水也换了几次,可郁闷啦!还是没出来。后来不知道怎么了,又出来了,但是总觉得没有筛引物的时候条带多,清晰。
用心成就事业,善行快乐人生... ...
5楼2011-04-18 09:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +5 梁梁校校 2026-03-19 5/250 2026-03-20 05:54 by laoshidan
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +3 sbdksD 2026-03-19 3/150 2026-03-19 23:21 by fmesaito
[考研] 288求调剂 +15 于海海海海 2026-03-19 15/750 2026-03-19 22:41 by 学员8dgXkO
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +3 Ncdx123456 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:18 by houyaoxu
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭! 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[基金申请] 被我言中:新模板不强调格式了,假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见