24小时热门版块排行榜    

查看: 826  |  回复: 10
当前主题已经存档。

arniekyo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pet28a

我现在构建一个原核表达载体,以pET28-a为骨架,用Nde1酶切过后,由于一些原因不得不更换Nco1酶切位点,由于时间紧迫,想直接把Nde1酶切的回收产物再用NCO1进行酶切,因为这两个酶切位点很近,请教大家这样可以么
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-18 13:26
你做单酶切吗?看一下它的图谱,看你的用途了。假如是单酶切构建重组质粒的话,你得看酶切过后的黏性末端是否还可以连上。

[ Last edited by gaozx123 on 2010-3-18 at 10:27 ]
2楼2010-03-18 10:22:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arniekyo

铜虫 (小有名气)

我现在的pet2是经过nde1和xho1双酶切的回收产物,不知道这样可以么
3楼2010-03-18 10:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的目的片段有哪个酶切位点啊?
4楼2010-03-18 10:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-18 13:26
具体有几个bp啊,应该只要能够满足NCO1保护碱基数目就应该能行,所以只要不低于4bp就能行
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
5楼2010-03-18 10:35:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arniekyo

铜虫 (小有名气)

差不多有60bp
6楼2010-03-18 10:55:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by arniekyo at 2010-03-18 10:55:20:
差不多有60bp

那等没有问题,做吧!
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
7楼2010-03-18 10:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-03-18 10:56:47:

那等没有问题,做吧!

上个打错了 ,那肯定没有问题,做吧
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
8楼2010-03-18 10:57:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arniekyo

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-03-18 10:56:47:

那等没有问题,做吧!

做上了,谢谢啊,等出结果再看
9楼2010-03-18 15:38:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
NdeI 和NotI 之间有一个pelB信号肽吧。如果LZ不是要表达到胞外或者有自身的信号肽的话,应该可以。
10楼2010-03-18 16:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 arniekyo 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见