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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pet28a
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arniekyo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pet28a

我现在构建一个原核表达载体，以pET28-a为骨架，用Nde1酶切过后，由于一些原因不得不更换Nco1酶切位点，由于时间紧迫，想直接把Nde1酶切的回收产物再用NCO1进行酶切，因为这两个酶切位点很近，请教大家这样可以么
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1楼 2010-03-18 10:15:33
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Charlie1331

金虫 (正式写手)
★
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NdeI 和NotI 之间有一个pelB信号肽吧。如果LZ不是要表达到胞外或者有自身的信号肽的话，应该可以。
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10楼2010-03-18 16:27:18
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-03-18 13:26
你做单酶切吗？看一下它的图谱，看你的用途了。假如是单酶切构建重组质粒的话，你得看酶切过后的黏性末端是否还可以连上。

[ Last edited by gaozx123 on 2010-3-18 at 10:27 ]
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2楼2010-03-18 10:22:08
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arniekyo

铜虫 (小有名气)
我现在的pet2是经过nde1和xho1双酶切的回收产物，不知道这样可以么
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3楼2010-03-18 10:24:01
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的目的片段有哪个酶切位点啊？
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4楼2010-03-18 10:28:17
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