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mltragassi

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谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看，我的（电极）上样缓冲液是：PH7.8的Tris-HCl，5%巯基乙醇，2%的SDS。有需要改进的吗？多谢了。

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1楼 2010-03-13 10:38:52

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HarveyWang

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amisking(金币+4): 2010-03-13 20:10

引用回帖:

Originally posted by mltragassi at 2010-03-13 10:38:52:
谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看，我的（电极）上样缓冲液是：PH7.8的Tris-HCl，5%巯基乙醇，2%的SDS。有需要改进的吗？多谢了。

请注意我所说的缓冲液名称。
您的很可能是指蛋白上样Buffer，里面缺了甘油和溴酚蓝啊，

配方和蛋白样品处理方法直接copy我的就行啦。

若您的发酵液上清中的蛋白含量过低，可以先三氯乙酸（5~10%）沉淀浓缩，然后NaOH溶解，最后HCl调成中性的，再加入适量的蛋白上样Buffer。

例如发酵液可以由10 mL 浓缩成200-500uL。

或者直接拿发酵液100 uL加20uL蛋白上样Buffer来处理，然后加大蛋白上样量，例如上40uL，这样做浓缩效果是没有的，只是增加电泳时的蛋白量。