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mltragassi金虫 (正式写手)
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【求助/交流】HarveyWang大虾,来领金币。谢谢你的帮助。
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| 谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看,我的(电极)上样缓冲液是:PH7.8的Tris-HCl,5%巯基乙醇,2%的SDS。有需要改进的吗?多谢了。 |
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HarveyWang
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amisking(金币+4): 2010-03-13 20:10
amisking(金币+4): 2010-03-13 20:10
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请注意我所说的缓冲液名称。 您的很可能是指蛋白上样Buffer,里面缺了甘油和溴酚蓝啊, 配方和蛋白样品处理方法直接copy我的就行啦。 ![]() 若您的发酵液上清中的蛋白含量过低,可以先三氯乙酸(5~10%)沉淀浓缩,然后NaOH溶解,最后HCl调成中性的,再加入适量的蛋白上样Buffer。 例如发酵液可以由10 mL 浓缩成200-500uL。 或者直接拿发酵液100 uL加20uL蛋白上样Buffer来处理,然后加大蛋白上样量,例如上40uL,这样做浓缩效果是没有的,只是增加电泳时的蛋白量。 ![]() 电泳Buffer是10X的配置(看我的SDS-PAGE的帖子),不叫 电极上样Buffer。 最后,以后就不用单独开贴来谢我啦,给小木虫省点版面^_^ |

2楼2010-03-13 18:01:03
HarveyWang
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3楼2010-03-13 18:03:26













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