24小时热门版块排行榜    

查看: 194  |  回复: 2
当前主题已经存档。

mltragassi

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】HarveyWang大虾,来领金币。谢谢你的帮助。

谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看,我的(电极)上样缓冲液是:PH7.8的Tris-HCl,5%巯基乙醇,2%的SDS。有需要改进的吗?多谢了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 2010-03-13 20:10
引用回帖:
Originally posted by mltragassi at 2010-03-13 10:38:52:
谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看,我的(电极)上样缓冲液是:PH7.8的Tris-HCl,5%巯基乙醇,2%的SDS。有需要改进的吗?多谢了。

请注意我所说的缓冲液名称。
您的很可能是指蛋白上样Buffer,里面缺了甘油和溴酚蓝啊,

配方和蛋白样品处理方法直接copy我的就行啦。

若您的发酵液上清中的蛋白含量过低,可以先三氯乙酸(5~10%)沉淀浓缩,然后NaOH溶解,最后HCl调成中性的,再加入适量的蛋白上样Buffer。

例如发酵液可以由10 mL 浓缩成200-500uL。

或者直接拿发酵液100 uL加20uL蛋白上样Buffer来处理,然后加大蛋白上样量,例如上40uL,这样做浓缩效果是没有的,只是增加电泳时的蛋白量。



电泳Buffer是10X的配置(看我的SDS-PAGE的帖子),不叫  电极上样Buffer。

最后,以后就不用单独开贴来谢我啦,给小木虫省点版面^_^
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2010-03-13 18:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

mltragassi(金币+8): 2010-03-15 09:03
引用回帖:
Originally posted by mltragassi at 2010-03-13 10:38:52:
谢谢你给我的指导。太谢谢了。你再帮我看看,我的(电极)上样缓冲液是:PH7.8的Tris-HCl,5%巯基乙醇,2%的SDS。有需要改进的吗?多谢了。

另外,您是不是就是单纯看看走发酵液蛋白啊?不用非变性电泳吧?
我的那些配方是SDS——PAGE的。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2010-03-13 18:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mltragassi 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见