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【讨论】新手求助co-ip的一个问题
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| 最近在跟着师兄学co-ip,师兄一再嘱咐我加beeds和抗体的时候要特别小心,因为没有办法控制上样量,因此只能凭自己感觉尽量使上样量一致。我就想,可不可以在上样之前先测定蛋白质浓度呢,因为我们将蛋白样品从beeds上煮下来的时候loading buffer 里已经有溴酚蓝了,所以不可能煮下来之后测定,那么既然溴酚蓝不是影响将样品从beeds上煮下来的因素,那么可不可以先就用水或某种无色缓冲液将样品煮下来,测定浓度后再加溴酚蓝继续处理呢?但是又考虑到煮过后蛋白质变性了是不是不能测定,所以来这里请教下各位师兄师姐,谢谢大家~ |
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金虫 (正式写手)
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