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【讨论】新手求助co-ip的一个问题
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| 最近在跟着师兄学co-ip，师兄一再嘱咐我加beeds和抗体的时候要特别小心，因为没有办法控制上样量，因此只能凭自己感觉尽量使上样量一致。我就想，可不可以在上样之前先测定蛋白质浓度呢，因为我们将蛋白样品从beeds上煮下来的时候loading buffer 里已经有溴酚蓝了，所以不可能煮下来之后测定，那么既然溴酚蓝不是影响将样品从beeds上煮下来的因素，那么可不可以先就用水或某种无色缓冲液将样品煮下来，测定浓度后再加溴酚蓝继续处理呢？但是又考虑到煮过后蛋白质变性了是不是不能测定，所以来这里请教下各位师兄师姐，谢谢大家~ |
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2楼2010-03-15 21:52:55