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muchonghh

[交流] 【求助】请教:流动相复溶问题!

大家好,我做一个血浆的样品分析方法学,
sci文献报道的有不少用蛋白质沉淀的方法,沉淀剂用的甲醇,
我在重复的时候发现,当挥干之后,100ul流动相复溶,再离心的时候,除了底部的少许沉淀,100ul的溶液中还漂浮有肉眼可见的细小沉淀,这样子肯定是不能直接进液质了,请问这种情况是为什么呢?
我沉淀蛋白用的6倍量的乙腈(甲醇也试过了),离心转速13000rpm,10min。。。

请问大家有什么好的解决办法么?我在液相上试了一下,发现回收率还不错,这是这种小沉淀是怎么来的呢?肯定进液质会堵柱子啊。。。
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hellohygo

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):3Q~欢迎常来分析版 2010-03-03 18:53
这是由于甲醇、乙腈等有机溶剂在将你的药物萃取出来的同时,也会将血浆中的某些蛋白质、磷脂、脂肪等一同萃取。你说的“小沉淀”,本人认为是蛋白。这种情况,我们一般将样品过一次性、针筒式滤膜。
2楼2010-03-03 15:58:22
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jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

★ ★
佳怡(金币+2):3Q~ 2010-03-04 20:59
建议:1.过0.45或0.22um滤膜;
         2.效果不好的话,样品预处理采用液液萃取或固相萃取试试
3楼2010-03-04 15:33:52
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