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在雨中

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】请教DNA提取高手,什么试剂能使土壤中的细胞分散于溶液中? 已有3人参与

帮同学咨询下DNA提取高手,什么试剂能使土壤中的细胞很好的分散于溶液中?
近来提取土壤中DNA,尝试了不少方法,效果不好。想试验另外一种间接的方法,就是让土壤中的细胞先侧地的悬浮于试剂中,然后将这些细胞分离、裂解并提取,纯化DNA。现在的小弟的问题是:到底是哪些试剂的加入能够促进土壤中细胞溶解于试剂?有相关的表面活性剂之类的东东吗?请高手不吝赐教。重金悬赏答案。

[ Last edited by 在雨中 on 2010-3-18 at 10:28 ]
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Charlie1331

金虫 (正式写手)

在雨中(金币+5):谢谢您的回答。 2010-03-04 20:19
玻璃珠打散不是比加入有机试剂更好吗?有机试剂的加入还有之后的去除等问题……
7楼2010-03-03 15:44:21
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unameder

木虫 (小有名气)

在雨中(金币+1):谢谢 2010-03-03 14:40
当时用文献的方法怎么着也提不出来,偶尔提出来也不能用,后来用了这个试剂盒,还算是比较好用,PCR,酶切都没问题,你可以参考一下
http://www.bioteke.com/chn/showproduct.asp?id=305
3楼2010-03-03 13:01:32
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j2

木虫 (正式写手)

在雨中(金币+1):有没有添加某种化学试剂的方法强化细胞溶解于试剂中的? 2010-03-03 14:40
振荡混匀吧,加玻珠,再离心去杂
修炼ing,当虫仙……
4楼2010-03-03 13:02:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

在雨中(金币+2):感谢您的应助。 2010-03-03 14:42
在雨中(金币+5):再给5个 2010-03-04 20:20
不用那么麻烦,我是用PBS先洗一遍去除可溶杂质,然后重悬于裂解液中震荡温育,破细胞膜,释放DNA等分子。然后离心去土壤,溶液里面就都是DNA了。接下来可以用酚法抽提
如果土壤中DNA的丰度比较低,则可以用类似提质粒时的溶液I重悬用土壤,然后低速离心去土壤,再稍高速离心收集细胞即可
5楼2010-03-03 13:51:36
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