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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教DNA提取高手，什么试剂能使土壤中的细胞分散于溶液中？
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在雨中

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】请教DNA提取高手，什么试剂能使土壤中的细胞分散于溶液中？ 已有3人参与

帮同学咨询下DNA提取高手，什么试剂能使土壤中的细胞很好的分散于溶液中？
近来提取土壤中DNA，尝试了不少方法，效果不好。想试验另外一种间接的方法，就是让土壤中的细胞先侧地的悬浮于试剂中，然后将这些细胞分离、裂解并提取，纯化DNA。现在的小弟的问题是：到底是哪些试剂的加入能够促进土壤中细胞溶解于试剂？有相关的表面活性剂之类的东东吗？请高手不吝赐教。重金悬赏答案。

[ Last edited by 在雨中 on 2010-3-18 at 10:28 ]
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1楼 2010-03-03 10:49:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

r502203

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提土壤用试剂盒啊，OMEGA的专门土壤DNA试剂盒！600-800快吧
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9楼2010-08-15 15:30:49
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普通回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
在雨中(金币+1):谢谢。 2010-03-03 14:25
PBS可以悬浮细胞
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2楼2010-03-03 12:54:10
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unameder

木虫 (小有名气)
在雨中(金币+1):谢谢 2010-03-03 14:40
当时用文献的方法怎么着也提不出来，偶尔提出来也不能用，后来用了这个试剂盒，还算是比较好用，PCR,酶切都没问题，你可以参考一下
http://www.bioteke.com/chn/showproduct.asp?id=305
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3楼2010-03-03 13:01:32
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j2

木虫 (正式写手)
在雨中(金币+1):有没有添加某种化学试剂的方法强化细胞溶解于试剂中的？ 2010-03-03 14:40
振荡混匀吧，加玻珠，再离心去杂
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2010-03-03 13:02:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
在雨中(金币+2):感谢您的应助。 2010-03-03 14:42
在雨中(金币+5):再给5个 2010-03-04 20:20
不用那么麻烦，我是用PBS先洗一遍去除可溶杂质，然后重悬于裂解液中震荡温育，破细胞膜，释放DNA等分子。然后离心去土壤，溶液里面就都是DNA了。接下来可以用酚法抽提
如果土壤中DNA的丰度比较低，则可以用类似提质粒时的溶液I重悬用土壤，然后低速离心去土壤，再稍高速离心收集细胞即可
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5楼2010-03-03 13:51:36
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叶痕@

木虫 (初入文坛)
在雨中(金币+1):谢谢 2010-03-03 14:42
PBS应该行
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6楼2010-03-03 14:26:02
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Charlie1331

金虫 (正式写手)
在雨中(金币+5):谢谢您的回答。 2010-03-04 20:19
玻璃珠打散不是比加入有机试剂更好吗？有机试剂的加入还有之后的去除等问题……
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7楼2010-03-03 15:44:21
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j2

木虫 (正式写手)
在雨中(金币+5):谢谢您的应助。 2010-03-04 20:20
只有革兰氏阳性菌会加溶菌酶，其他不用什么有机试剂啊
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2010-03-04 12:54:10
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大飞370

铜虫 (小有名气)
加脱脂牛奶吧。具体方法你上网查查。还能去除腐植酸等杂质。
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10楼2010-08-17 20:14:39
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