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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA电泳
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pidou

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】RNA电泳

请高手指点RNA电泳中应该注意什么问题？？

1、电泳槽如何处理？现在有人告诉我用0.1MNaOH和0.1EDTA混合液浸泡过夜，然后用DEPC水冲洗干净即可，这样可以吗？直接用0.1MNaOH浸泡过夜可以吗？

2、EB的天价问题？？在跑电泳的时候，跑完后将胶浸入EB（不是DEPC水配置，双蒸水配置的）溶液中的话，RNA会不会降解啊？

3、凝胶本身会不会有RNase酶啊？？会不会降解RNA啊？

4还有其他注意的问题吗？？

谢谢，万分的！！！
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1楼 2010-03-02 22:36:16
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gaozx123

金虫 (小有名气)
pidou(金币+2):谢谢你哦，可否认识一下，将来长期联系，你是在北京吗？ 2010-03-03 11:25
1.直接用0.1MNaOH浸泡过夜,然后用DEPC水冲洗干净即可.
2.这个会有很少量的降解。最多染10分钟，视情况而定吧，我们一般都将EB加到胶里面跑。跑完直接照相。
3.TAE缓冲液用DEPC水配制，瓶子要干烘或灭菌两次。制胶就用该缓冲液加到琼脂糖中。
4.电泳缓冲液也用DEPC水最好。
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2楼2010-03-03 08:33:26
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jasco

木虫 (正式写手)
pidou(金币+1):谢谢你哦，可否认识一下，将来长期联系，你是在北京吗？ 2010-03-03 11:26
如果要求不严格的话，可以不用处理，跟跑dna胶一样，
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3楼2010-03-03 08:43:20
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pidou

木虫 (正式写手)
如果还有的虫友有好的建议的话，可以继续给加金币啊
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4楼2010-03-03 11:26:35
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的方法，有点粗糙，但是简便易行，什么都不用处理，就是提高电压（通常最小的那种电泳槽180V，要是大电泳槽还可以提高），尽可能短时电泳，20分钟之内跑完，很少量的降解，不会影响RNA的观察。如果这么短时间内就降解，观察不到了，那说明你提的RNA也就不怎么样了。

相信我，屡试不爽
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5楼2010-03-03 13:07:51
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