24小时热门版块排行榜    

查看: 1384  |  回复: 16
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

elliott2591

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】3‘RACE adapter sequence

求助3’RACE 接头序列
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elliott2591

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-01-26 14:49:52:


我测序的结果有的是没有Poly(A),但是对了,这就是所谓的poly(A)有影响,做TA克隆再测序就好了,但是有的没有poly(A),而且序列根本不对,那就是3‘RACE失败了,获得的片段不是目标片段,看看你属于哪种 ...

此外,我也是连到T载体上送去测序的
9楼2010-01-26 22:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2): 1-25 19:36
elliott2591(金币+1): 2010-01-29 17:35
你想求助什么, 你什么地方不明白,3‘RACE产物最好是克隆测序效果好,我上次胶回收后直接测序,九个样,序列对了7个,但是只有一个测到poly(A),据说是poly(A)和胶回收对测序都有影响,所以现在又克隆送质粒了,这样测得效果可以保证
2楼2010-01-25 16:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 1-25 19:36
接头序列在试剂盒说明里应该有吧。marathon的是:
5‘-CTAATACGACTCACTATAGGGCTCGAGCGGCCGCCCGGGCAGGT-3'
3楼2010-01-25 19:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

哦,我才看明白。
我用的clontech的盒子
3‘RACE cDNA合成的引物是:
5'–AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTAC(T)30V N–3'
之后用的是Universal primer A mix:
Long (0.4 µM):
5'–CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT–3'
Short (2 µM):
5'–CTAATACGACTCACTATAGGGC–3'
4楼2010-01-25 19:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +6 tcxiaoxx 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:23 by edmund7
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见