[交流] 【求助/交流】弱问一下农杆菌转化操作的一些细节问题

Originally posted by fungixx at 2010-1-23 12:53:
DMSO配制利福平不用过滤；
没在意需不需要避光，应该不用吧；
GV3101的抗性是硫酸庆大跟利福平吧，没有kan抗性吧！,我也用这株菌；
阳性克隆可以用菌液pcr，提质粒酶切也行

Originally posted by biogefart at 2010-1-23 08:21:
楼上说的有理，最好滤一下抗生素，另外菌株和质粒都是kan抗性的话，质粒的抗性筛选功能就失去了，到时候长的满满板的估计得挑一个月克隆做PCR鉴定。

Originally posted by jcjcj at 2010-1-23 13:18:


可是我拿到的菌株对方说是卡那和利福平抗的啊
gv3101也有不同的菌株吗
不需要避光吗？利福平不是光敏感的吗？

[ Last edited by jcjcj on 2010-1-23 at 13:25 ]

Originally posted by fungixx at 2010-1-23 13:35:


不会的，除非他给你是转化了的：Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101 is sen ...