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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酵母摇瓶发酵问题
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libra1982

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酵母摇瓶发酵问题

我用的是毕赤酵母发酵系统，利用甲醇诱导，是MUTs表型。现在总是染菌，镜检是小杆菌。不知道是哪里出现问题。而且发酵液会变成碱性，不知道是不是染菌的原因，现在酶活都测不到了，原先有点染菌但是酶活还是有的，现在就是没有酶活，染菌，PH由原来的5.5变成8左右，请高手指点一下。
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1楼 2010-01-22 09:36:54
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:43
无菌操作不过关吧
可以考虑加点抗生素
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2楼2010-01-22 10:25:39
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:43
是不是种子培养基就已经污染了菌，建议先纯化一下毕赤酵母
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-01-22 10:55:55
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gn2003_0

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-22 13:44
1、保证菌种是纯化的
2、检查是否是灭菌锅出了问题。
3、锥形瓶在装培养基是的体积比例是不大于三分之一，否则可能不彻底。
4、棉塞或者封口膜是否有问题。
5、空气系统是否良好。
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4楼2010-01-22 11:08:55
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:44
菌种保存如果是甘油管的话 最好重新涂布平板  挑单克隆接种 怕是源头染菌
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
5楼2010-01-22 12:44:58
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zhhl2981

木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:44
无菌操作不过关吧
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6楼2010-01-22 12:45:29
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hhwang

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-22 13:44
首先 估计是菌种不纯 可以用考虑重新划线挑单克隆
其次 在培养酵母的时候 可以将培养基PH调整3以下 这个可以抑制杂菌
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7楼2010-01-22 13:08:53
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dongjian007

金虫 (知名作家)
★ ★
libra1982(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:44
菌种不纯 可以用划线法挑单克隆
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8楼2010-01-22 13:12:10
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-22 13:44
毕赤酵母一般不容易染菌，因为它是酸性菌，大多数菌在里面都不长，你的情况很可能就是种子里面就有菌！
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梦在路就在！
9楼2010-01-22 13:21:27
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libra1982

银虫 (小有名气)
谢谢各位的回帖，我种子液镜检过没有染菌，要染也是后来染得。我是想问它PH升高了是因为我染了杂菌的原因吗，这样是不是就不会有酶活了。如果解决了杂菌问题是不是其他问题也就解决了呢
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10楼2010-01-22 17:13:06
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