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cll1024

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒酶切

大家好!有个问题需要向大家请教啊:我提的质粒,经核酸测定仪测过浓度和纯度,OD260/280在1.8左右,但用Hind III酶进行单切时,做了2管重复,结果同一个质粒一管酶切的效果很好,但另一管却出现拖尾状,好像是酶切后的质粒被降解了。我们又重新提取了质粒,连续重复了好几次以上的实验,结果都出现以上的情况。各位大侠有没有碰见过这样的情况啊,你们是怎么解决的啊?期待回复,谢谢啦!
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段家一凡

木虫 (正式写手)

东西全部换掉
2楼2010-01-18 21:39:07
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plantst5928

铜虫 (小有名气)

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 1-18 22:19
酶切的时间缩短一些,酶的量再小一些看看。
3楼2010-01-18 22:18:51
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gaozx123

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你看一下你的质粒和目的片段有几个Hind III的酶切位点,是不是还有其他的酶切位点,然后有的切了一个位点,有的还切了其他的位点。
另外,你要是能做出来一管好的就用好的接着往下做不就OK了?时间要紧,能做出来结果就好啊。
4楼2010-01-19 08:38:21
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wgq0355

铜虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼上说的对啊,有结果就行了。时间要紧。
关于实验我觉得,Hind III酶切位点应该不会 错吧
5楼2010-01-19 09:43:06
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沙中清泉

木虫 (正式写手)

没关系,经常遇到
6楼2010-01-19 09:52:09
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是酶有问题啊  一般不会发生这样的情况吧 我酶切质粒过夜都没有问题。建议把体系发上来大家看看
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
7楼2010-01-19 12:33:38
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