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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒酶切
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cll1024

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒酶切

大家好！有个问题需要向大家请教啊：我提的质粒，经核酸测定仪测过浓度和纯度，OD260/280在1.8左右，但用Hind III酶进行单切时，做了2管重复，结果同一个质粒一管酶切的效果很好，但另一管却出现拖尾状，好像是酶切后的质粒被降解了。我们又重新提取了质粒，连续重复了好几次以上的实验，结果都出现以上的情况。各位大侠有没有碰见过这样的情况啊，你们是怎么解决的啊？期待回复，谢谢啦!
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1楼 2010-01-18 19:12:05
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是酶有问题啊  一般不会发生这样的情况吧 我酶切质粒过夜都没有问题。建议把体系发上来大家看看
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
7楼2010-01-19 12:33:38
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plantst5928

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 1-18 22:19
酶切的时间缩短一些，酶的量再小一些看看。
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3楼2010-01-18 22:18:51
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你看一下你的质粒和目的片段有几个Hind III的酶切位点，是不是还有其他的酶切位点，然后有的切了一个位点，有的还切了其他的位点。
另外，你要是能做出来一管好的就用好的接着往下做不就OK了？时间要紧，能做出来结果就好啊。
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4楼2010-01-19 08:38:21
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wgq0355

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上说的对啊，有结果就行了。时间要紧。
关于实验我觉得，Hind III酶切位点应该不会 错吧
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5楼2010-01-19 09:43:06
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