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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kuuikaifeng

[交流] 【求助】求助:出峰时间太短,怎么回事?

样品是生物碱,用液相分出了一个峰,大概3分钟处出峰,梯度洗脱,
条件是:5min 20%乙腈-80%水(含5%乙酸),10min 30%-70%,10min 40%-60%,流速是1ml/min,
要拿去做LC-MS的,那边老师说出峰时间太短了,至少要5分钟之后才能做。
    我降低了流速,用0.6试了下,峰延迟到了4.5min,但是再降到0.4,峰就乱了;然后我又调整了流动相比例,乙腈梯度升高了10%,峰也是很乱的,但是整体趋势有延后,然后把乙腈梯度降低了10%,峰的趋势是提前的,但是也是很乱,请问各位,这是不是说明乙腈浓度提高能延迟出峰时间啊?但是流动相乙腈浓度升高和降低后,峰都变乱了,好像也没什么用,到底该怎么办呀,我是新手,不是很懂哒,请教各位了,谢谢!
   ps:实验室只有这根柱子了,没办法换了;如果把乙腈换成甲醇,有没有用呢?请教了
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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降低乙腈的起始比例

另外这峰乱了是什么意思?不是说分出了一个么?

还是有几个峰叠加在一起了
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2010-01-15 17:55:36
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070918

木虫 (著名写手)

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opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版交流讨论 1-15 22:04
乙腈浓度是要调小些,估计你所谓的峰乱了是和第一次的峰相比吧,你主要看你要的峰在哪里就行,流动相变化了峰肯定就和原来的不一样了
天道酬勤
3楼2010-01-15 18:02:59
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oxygen7341

木虫 (小有名气)


opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版交流讨论 1-15 22:05
恩,你可以在碱性条件下走看看,因为在你这个条件下,生物碱可能都是离子形式的化合物了,要想保留,在分子形式下会好一点,从ph=8.0往上调,注意柱子的耐碱性!
4楼2010-01-15 21:14:40
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wgx1128

金虫 (正式写手)


opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版 1-18 15:23
正常情况下乙腈浓度提高,峰的保留时间应该缩短,降低乙腈浓度,峰的保留时间应该延长。
峰乱了不知道是什么意思,如果是峰的位置变化了,顺序变化了那都正常。如果是峰重叠在一起了,梯度还需要调整。这只能慢慢摸条件。
选择快乐!
5楼2010-01-16 08:45:20
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峥岩

至尊木虫 (著名写手)

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你流动相有问题,不要往里边加酸
幸福是我们对生活的一种态度
6楼2010-01-18 13:57:54
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

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选择流动相10%乙腈水,1.0ml等度洗脱,做液质峰分开就行了。看来你的目标物极性很大啊
药物合成
7楼2010-01-18 14:05:27
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judy127

新虫 (小有名气)

用甲醇试,20%乙腈出峰还这么快,说明这种物质在柱子上的保留不好,甲醇的洗脱能力比乙腈弱,另外水相里先别加酸,酸是调节峰形的,先把RT搞定,再加酸。
8楼2010-01-20 14:41:30
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