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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR整个质粒
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR整个质粒

RT，我需要在一个质粒里面引入我要的酶切点，所以设计了引物把整个质粒PCR下来，请问有人做过这样的吗？谈下你的经验跟感想啊，大家互相交流交流啊。。。。。
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1楼 2010-01-09 09:16:29
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plantst5928

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
当然可以，点突变的原理是类似的。你再用引物扩PCR之后需要把原来的模板降解一下，然后转化就可以了。我记得是用DMT酶消化的。
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8楼2010-01-09 20:20:23
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boouy

银虫 (正式写手)
用得着那么做吗？
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2楼2010-01-09 09:24:23
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by boouy at 2010-1-9 09:24:
用得着那么做吗？

恩，没有办法啊，要用这个质粒，但是质粒本身的酶切点我都不能用。。。。所以就这样做了......
赞一下 回复此楼
3楼2010-01-09 09:29:17
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j2

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-9 20:28
是不是需要先酶切成线性哦？猜想中~~~~
赞一下(11人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2010-01-09 10:15:46
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